申请/专利权人：东北农业大学

申请日：2020-04-13

公开（公告）日：2024-06-11

公开（公告）号：CN111593128B

主分类号：C12Q1/6888

分类号：C12Q1/6888;C12Q1/686;C12N15/11

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.06.11#授权;2022.11.11#实质审查的生效;2020.08.28#公开

摘要：本发明提供一种鉴定东北林蛙遗传性别的分子标记。其主要特征是，提取东北林蛙脚趾组织的基因组，以提取的基因组DNA为模板，以含SEQIDNO:1和SEQIDNO:2所示序列的引物对进行PCR扩增反应。通过14%的聚丙烯酰胺凝胶对PCR扩增产物进行电泳检测，结果具有SEQIDNO:3所示核苷酸序列（222bp）对应条带的个体为遗传雄性东北林蛙，缺失SEQIDNO:3所示核苷酸序列对应条带的个体为遗传雌性东北林蛙。本发明其优点是，获得了东北林蛙遗传雄性特异性DNA分子标记，可快速、简便、准确地鉴定东北林蛙的遗传性别。本发明可获得伪雄个体，即生理为雄性，但遗传为雌性的个体。利用伪雄个体与雌性个体交配，其后代生理雌性的比例高达90%以上，可显著提高东北林蛙养殖的经济效益。

主权项：1.一种鉴定东北林蛙遗传性别的分子标记的应用，其特征是按以下步骤操作：（1）提取东北林蛙脚趾组织的基因组DNA，（2）以提取的基因组DNA为模板进行PCR扩增反应，PCR扩增反应所用上游引物为SEQIDNO:1所示序列，即5’-GGCTATTCGTCGCTACTAAAGG-3’，下游引物为SEQIDNO:2所示序列，即5’-GACTGCGTACGAATTTGA-3’；（3）用14%的聚丙烯酰胺凝胶对PCR扩增产物进行电泳检测，结果具有如SEQIDNO:3所示核苷酸序列对应的222bp条带的个体为遗传雄性东北林蛙，缺失SEQIDNO:3所示核苷酸序列对应条带的个体为遗传雌性东北林蛙；（4）对遗传雄性特异性条带进行回收纯化、测序，确定其为东北林蛙性别特异性分子标记，即SEQIDNO:3，所述分子标记表现为SEQIDNO:3所示核苷酸序列，GGCTATTCGTCGCTACTAAAGGTGGGGTCACTGGCACTTAATGCTGCCCAGTTCTGGGTCTCTAAAGAAGGACCGTTTAACATGAGAGTCTATGGGGAAACAGGGTCATCTTTAGGCATGTGCAGAAGTGAAAAATTTGTTTTGTTTCGTTTCGTTTCAATTCGTCATTTAATACATTTCGTTAAGTTAGGTTCGTTACATGTGTCAAATTCGTACGCAGTC，具有如SEQIDNO:3所示核苷酸序列的个体，表现为遗传雄性东北林蛙，缺失SEQIDNO3所示核苷酸序列的个体为遗传雌性东北林蛙。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 东北农业大学 一种鉴定东北林蛙遗传性别的分子标记及其应用方法

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