申请/专利权人：重庆医科大学

申请日：2023-11-13

公开（公告）日：2024-06-14

公开（公告）号：CN117517541B

主分类号：G01N30/06

分类号：G01N30/06;G01N30/08;G01N30/14;G01N30/72

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.06.14#授权;2024.02.27#实质审查的生效;2024.02.06#公开

摘要：本申请公开了一种测定血浆中双甘肽浓度的方法，涉及仪器分析技术领域。一种测定血浆中双甘肽浓度的方法，其包括如下步骤：血浆样品处理：取血浆样品，加入内标工作液混合后再加入1％FAACN混合后离心处理；离心处理后取上清液至磷脂去除板，放置于正压萃取装置上施加正压，收集萃取液并转移至EP管，于氮气流下吹干并复溶；固相萃取：将上述血浆样品处理步骤中复溶后的样品装载于固相萃取柱上进行固相萃取并洗脱，收集洗脱液至EP管，于氮气流下吹干并复溶，然后离心处理，取上清液作为待测样品；仪器检测：使用LC‑MSMS仪器对上述待测样品进行检测。其检测灵敏度高、专属性强，适用于大批量样本测定，检测效果好。

主权项：1.一种测定血浆中双甘肽浓度的方法，其特征在于，其包括如下步骤：血浆样品处理：取血浆样品，加入内标工作液混合后再加入1%FAACN混合后离心处理；离心处理后取上清液至磷脂去除板，放置于正压萃取装置上施加正压，收集萃取液并转移至EP管，于氮气流下吹干并复溶；固相萃取：将所述血浆样品处理步骤中复溶后的样品装载于固相萃取柱上进行固相萃取并洗脱，收集洗脱液至EP管，于氮气流下吹干并复溶，然后离心处理，取上清液作为待测样品；仪器检测：使用LC-MSMS仪器对所述待测样品进行检测；所述固相萃取步骤中，采用P-SCX固相萃取柱，规格为10mg1ml；萃取柱使用MeOH活化，使用1%的FAH2O平衡；萃取后使用1%的FAMeOH洗涤，采用2%的NH4OHMeOH洗脱；所述仪器检测步骤中，使用LC-MSMS仪器进行检测时，液相色谱的检测条件为：流动相A为0.1%的FAH2O，流动相B为ACN，柱温40℃，进样体积为2.00μL，流速为0.3mLmin，梯度洗脱15min；所述仪器检测步骤中，液相色谱梯度洗脱程序为：0～10min，流动相A比例由5%升至50%，流动相B比例由95%降至50%；10～12min，维持各相50%的比例；12～12.5min，流动相A比例由50%降至5%，流动相B比例由50升至95%；12.5～15min，维持5%流动相A和95%流动相B；所述仪器检测步骤中，使用LC-MSMS仪器进行检测时，质谱条件为：正离子模式，气体温度为350℃，气体流量为14Lmin；毛细管电压为5500V，喷嘴电压为500V；扫描方式为多重反应监测；用于定量分析的双甘肽离子对为mz=133.06→mz=76。

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百度查询： 重庆医科大学 一种测定血浆中双甘肽浓度的方法

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