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申请/专利权人：西南交通大学
申请日：2024-04-01
公开（公告）日：2024-06-18
公开（公告）号：CN118207300A
主分类号：C12Q1/6844
分类号：C12Q1/6844
优先权：
专利状态码：在审-公开
法律状态：2024.06.18#公开
摘要：本发明公开了一种双水相体系环介导等温扩增检测核酸的方法，具体为：双水相的制备：电子天平称取聚乙二醇和葡聚糖粉末，加入去离子水中，形成混合物水溶液，搅拌并静置至溶液变得清澈透明，形成两相分离完全的聚乙二醇葡聚糖双水相溶液；制备环介导等温扩增反应物，包括：核酸扩增反应液、引物、Bst聚合酶、SYTO‑9和核酸模板；在双水相去离子水体系中进行环介导等温扩增反应：将扩增反应物加入PCR管中，先后抽取聚乙二醇葡聚糖双水相、去离子水加入PCR管；之后将PCR管全部放入PCR仪。本发明采用温和简便的方法有效提高了环介导等温扩增的反应效率，具有较高的灵敏度，有望造福于分析诊断等领域。
主权项：1.一种双水相体系环介导等温扩增检测核酸的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1：双水相的制备：电子天平称取聚乙二醇和葡聚糖粉末，加入去离子水中，形成混合物水溶液，搅拌并静置至溶液变得清澈透明，形成两相分离完全的聚乙二醇葡聚糖双水相溶液；步骤2：制备环介导等温扩增反应物，包括：4.5～6.5μL核酸扩增反应液Mg2+、Tris-HCl、NH42SO4、KCl、甜菜碱和dNTPs、0.5～1μL引物、0.5～1μLBst聚合酶、0.25～0.5μLSYTO-9、1μL核酸模板；步骤3：在双水相去离子水体系中进行环介导等温扩增反应：将步骤2的扩增反应物加入PCR管1中，先后抽取步骤1中的聚乙二醇葡聚糖双水相各4～6μL加入PCR管1中；将步骤2的扩增反应物加入PCR管2中，取4～6μL去离子水加入PCR管2；之后将PCR管全部放入PCR仪。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 西南交通大学 一种双水相体系环介导等温扩增检测核酸的方法
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