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申请/专利权人：云南植虫药生物科技有限公司

摘要：本发明涉及植物组培技术领域，具体来说是一种滇橄榄组培快繁育苗方法及应用，步骤包括：取滇橄榄未木质化的顶端幼嫩茎段，经清洁后依次用75%酒精、饱和漂白粉溶液、0.15%升汞溶液消毒；消毒的外植体接种于初代诱导培养基中培养25～35天；初代诱导的丛生芽接种于继代增殖培养基中培养30～40天；继代增殖培养的丛生芽接种于生根培养基中培养30～40天。本发明将常规升汞的0.1%浓度改成0.15%，可使外植体消毒污染率控制在15%以内，且死亡率控制在20%以内，辅以本发明的初代诱导培养基，可将褐化的发生或影响降到最低，且初代诱导率可高达62%以上，增殖系数达到5.5左右，生根率达到95%以上。

主权项：1.滇橄榄Phyllanthusemblica组培快繁育苗方法，其特征在于，步骤包括：（1）外植体消毒：取野生滇橄榄Phyllanthusemblica未木质化的顶端幼嫩茎段，经清洁后依次用75%酒精消毒30～40s、无菌水冲洗3～4次，饱和漂白粉溶液消毒40～50min、无菌水冲洗2～3次，0.15%升汞溶液消毒2～3min、无菌水冲洗7～8次；（2）初代诱导培养：消毒的外植体接种于初代诱导培养基中培养25～35天；所述初代诱导培养基的配方为：WPM+NAA0.02～0.05mgL+ZT1.0～1.2mgL+6-BA3.0～4.0mgL+GA30.1～0.2mgL+活性炭0.8～1.3gL；（3）继代增殖培养：初代诱导的丛生芽接种于继代增殖培养基中培养30～40天；所述继代增殖培养基的配方为：WPM+NAA0.01～0.02mgL+TDZ0.8～1.0mgL+ZT0.5～1.0mgL+尿素0.05～0.1gL；（4）生根培养：继代增殖培养的丛生芽接种于生根培养基中培养30～40天；所述生根培养基的配方为：SH+IBA0.2～0.4mgL+IAA1.0～1.5mgL+PPP3330.02～0.05mgL+蛋白胨100～200mgL+活性炭0.1～0.3gL；（5）生根苗驯化：将组培生根苗移栽于生根基质中，驯化环境为65%～75%遮阴率的大棚下，移栽后喷施一次30～40mgL的水杨酸，后每隔5～7天喷施一次30～40mgL的水杨酸。

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