申请/专利权人：华悦汇(上海)健康科技有限公司;上海中赛德康生物制药有限公司

申请日：2024-03-20

公开（公告）日：2024-06-21

公开（公告）号：CN118217437A

主分类号：A61L15/40

分类号：A61L15/40;A61L15/18;A61L15/28;A61L15/44

优先权：

专利状态码：在审-公开

法律状态：2024.06.21#公开

摘要：本发明公开了一种内皮祖细胞分泌的外泌体的新应用。本发明中，以健康的脐带血内皮祖细胞为原料，配合人脐带间充质干细胞外泌体冻干粉末，经过制备得到包含高活力的外泌体医用敷料贴，通过激活使用者患处的机体的内源性组织特异性干细胞，从而起到促进伤口组织修复的作用，减少了伤口腐烂的概率，使得各类创伤的救治处理更加高效快捷，同时医用敷料贴的内部添加了外泌体稳定液，使得医用敷料贴内部的外泌体能够在常温条件下长期保存外泌体，保护液能够提高外泌体系带电量，避免外泌体在粒径、浓度和活性上的变化，保护外泌体的完整性，从而提高了制备的提高了医用敷料贴内部的保存时的便利性。

主权项：1.一种内皮祖细胞分泌的外泌体的新应用，其特征在于：所述新应用包括以下步骤：S1：先进行内皮祖细胞分泌的外泌体的制备，选择合适的内皮祖细胞来源；S2：制备内皮祖细胞分泌的外泌体培养的支架或基质：为细胞提供三维生长的支持结构，使用生物可降解的支架材料或基质如明胶、胶原等，也可以使用无细胞的支架；S3：之后将内皮祖细胞接种到支架培养基上，确保细胞均匀分布在三维结构中；S4：之后在三维结构中进行内皮祖细胞培养，进行细胞生长监测，诱导分化：根据需要，可以通过添加特定因子或调控培养条件来诱导内皮祖细胞向内皮细胞方向分化，促进其发育成熟，从而通过三维培养得到内皮祖细胞；S5：采用含无外泌体血清的培养基培养步骤a中得到的内皮祖细胞，得到上清液，将上清液通过差速离心后制备得到内皮祖细胞外泌体；S6：制备内皮祖细胞外泌体稳定液，称取果胶5～10重量份、海藻酸钠5～10重量份与磷酸盐缓冲液1000～1100重量份；S7：将步骤S6中称取的原料充分混合之后，搅拌均匀，得到稳定液；S8：之后从脐带间充质干细胞从组织迁移到塑料表面的获取细胞；S9：将步骤S8中制得的干细胞消化离心，细胞沉淀与0.8～1.3molL海藻糖水溶液以体积比1:3制成细胞悬液，于37℃孵育6h，细胞悬液与冻干保护剂20％人血清白蛋白等体积混匀，37℃平衡30min，置于冻存盒中于-80℃预冻24h然后置于冻干机处理，从而制得人脐带间充质干细胞外泌体冻干粉末；S10：称取步骤S5中的内皮祖细胞外泌体150～200重量份、步骤S7中的稳定液5～10重量份和步骤S9中的人脐带间充质干细胞外泌体冻干粉末150～200重量份，充分混合均匀之后得到外泌体综合粉；S11：将步骤S1中制得的外泌体综合粉置于医用敷料贴的内侧表面，即可结束整个皮祖细胞分泌的外泌体的新应用过程。

全文数据：

权利要求：

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