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申请/专利权人：南京大学;江苏南创化学与生命健康研究院有限公司

摘要：本发明公开了一种具有谷氨酰胺合成酶活性的纳米酶及其制备方法和应用。本发明首先分别制备STPE‑NCS，PolyP‑NH2，然后利用制备的STPE‑NCS和PolyP‑NH2混合反应制备STPE‑polyP，最后将STPE‑polyP、十六烷基三甲基溴化铵与四甲基氢氧化铵混合反应后，并加含锰离子的油酸盐溶液反应，再超声分散，离心得到的上清液，干燥即得纳米酶。本发明所制备的纳米酶具有类谷氨酰胺合成酶活性，在仿生催化领域中具有巨大的潜力；且成本低廉、工艺流程简单、设备要求低、设计方案灵活多变，有利于工业化生产。

主权项：1.一种具有谷氨酰胺合成酶活性的纳米酶的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：1STPE-NCS制备：将TPE-NCS与浓硫酸混合反应后，将混合物加入-5℃～10℃的乙酸乙酯中，于静置后，过滤，所得沉淀加水溶解后，再加碱液调pH至7～11；之后将所得溶液加入丙酮中沉淀，过滤，用丙酮洗涤沉淀，得到STPE-NCS；2PolyP-NH2制备：将2,2′-乙烯二氧基双乙胺加入多聚磷酸盐溶液中，再加入1-乙基-3-3-二甲氨基丙基碳二亚胺盐酸盐，调pH至6.5，加热后，用碱液调pH至10，将所得产物在乙醇中沉淀纯化，离心，收集沉淀，冻干，得到PolyP-NH2，备用；3STPE-polyP制备：将步骤2制备的PolyP-NH2溶于缓冲液得到PolyP-NH2溶液，加入步骤1制备的STPE-NCS，室温搅拌反应后，乙醇中沉淀纯化，离心，收集沉淀，溶解后，纯化，冷冻干燥，得到STPE-polyP；4纳米酶制备：将步骤3制备的STPE-polyP、十六烷基三甲基溴化铵、四甲基氢氧化铵加水溶解，超声分散后，加热搅拌2～24h得到聚磷-CATB-TMAH溶液；将锰盐、油酸钠溶于水，加热搅拌2～6h得到Mn2+-油酸盐水溶液；将聚磷-CATB-TMAH溶液加入Mn2+-油酸盐水溶液，加热搅拌6～10h后，离心，收集沉淀，洗涤，干燥得到块状纳米酶初产物；将块状纳米酶初产物加水超声分散后，离心，所得上清液，干燥，得到具有谷氨酰胺合成酶活性的纳米酶，备用。

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