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【发明授权】一种提高饲料用的抗菌肽天蚕素收率的方法_中农颖泰林州生物科园有限公司_202011592437.0 

申请/专利权人:中农颖泰林州生物科园有限公司

申请日:2020-12-29

公开(公告)日:2024-06-21

公开(公告)号:CN112575047B

主分类号:C12P21/02

分类号:C12P21/02;C07K14/435;C07K1/14;A23K20/195;A23K20/147;C12R1/125

优先权:

专利状态码:有效-授权

法律状态:2024.06.21#授权;2021.04.16#实质审查的生效;2021.03.30#公开

摘要:本发明提供一种提高饲料用的抗菌肽天蚕素收率的方法。发酵得到的发酵液先加入柠檬酸,柠檬酸酸化至发酵液pH为4,再进行浓缩。本发明提供的提高饲料用的抗菌肽天蚕素收率的方法,通过使用柠檬酸酸化至发酵液pH为4,饲料用的抗菌肽天蚕素收率为85%‑95%,大大提高了饲料用的抗菌肽天蚕素的收率,而且方法比较简单。

主权项:1.一种提高饲料用的抗菌肽天蚕素收率的方法,其特征在于:ZL200810132258.1公开的方法得到的工程枯草芽孢杆菌经过种子制备、发酵后得到的发酵液先加入柠檬酸,柠檬酸酸化至发酵液pH为4,再进行浓缩;种子制备及发酵的步骤为,(1)种子制备:(a)摇瓶菌种:在250ml的锥形瓶上,装30mlLB培养基,将一个枯草芽孢杆菌菌落接种于LB培养基上,摇瓶培养条件下培养;培养条件为:温度为37℃、转速每分钟220转、培养10小时;或者,温度为34℃、转速每分钟220转、培养13小时;或者,温度为36℃下、转速每分钟220转、培养11.5小时;(b)种子罐培养:从种子培养到最后30M3发酵罐发酵培养需要3级种子扩大,一级种子扩大:将摇瓶培养好的种子按1:100分别扩大于3个500ml的锥形瓶,装50ml种子培养基,种子培养条件下培养;二级种子扩大:将一级种子扩大的种子按1:100比例扩大于30L种子发酵罐,装15L种子培养基,种子培养条件下培养;三级种子扩大:将二级扩大的种子按1:100扩大于3M3种子发酵罐,装1.5M3种子培养基,种子培养条件下培养;种子培养基为LB培养基;种子培养条件为:(Ⅰ)温度为37℃,转速每分钟160转,罐压0.06MPa,通风量1:1,接种量1%,一级种子扩大培养时间为10h,二级种子扩大培养时间为8h,三级种子扩大培养时间为6h;或者,(Ⅱ)温度为34℃,转速每分钟160转,罐压0.06MPa,通风量1:1,接种量1%;一级种子扩大培养时间为13小时,二级种子扩大培养时间为11小时,三级种子扩大培养时间为9小时;或者,(Ⅲ)温度为36℃,转速每分钟160转,罐压0.06MPa,通风量1:1,接种量1%,一级种子扩大培养时间为11小时,二级种子扩大培养时间为9小时,三级种子扩大培养时间为7.5小时;(2)发酵:将三级种子扩大培养好的种子按1:20接种于30M3发酵罐,装21M3发酵培养基,发酵培养条件下培养:(Ⅰ)发酵培养基:按质量分数计,蛋白胨2%,玉米粉3%,豆饼粉2%,磷酸二氢钾0.5%,硫酸镁0.6%,硫酸铵0.1%,其余为饮用水,发酵培养基pH为7.2;发酵培养基121℃灭菌30分钟,然后接种菌种进行发酵培养,发酵培养条件为,温度为37℃,转速每分钟150转,罐压0.05MPa,通风量1:1,培养30小时;或者,(Ⅱ)发酵培养基:按质量分数计,蛋白胨1.8%,玉米粉3.2%,豆饼粉2.1%,磷酸二氢钾0.5%,硫酸镁0.6%,硫酸铵0.1%,其余为饮用水,发酵培养基pH为7.2;发酵培养基121℃灭菌30分钟,然后接种菌种进行发酵培养,发酵培养条件为,温度为34℃,转速每分钟150转,罐压0.05MPa,通风量1:1,培养35小时;或者,(Ⅲ)发酵培养基:按质量分数计,蛋白胨2.3%,玉米粉2.8%,豆饼粉1.9%,磷酸二氢钾0.5%,硫酸镁0.6%,硫酸铵0.1%,其余为饮用水,发酵培养基pH为7.2;发酵培养基121℃灭菌30分钟,然后接种菌种进行发酵培养,发酵培养条件为,温度为36℃,转速每分钟150转,罐压0.05MPa,通风量1:1,培养32小时。

全文数据:

权利要求:

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