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申请/专利权人：上海奥博生物医药股份有限公司
摘要：本发明公开了一种pET商品化质粒启动子筛选和置换方法。该方法通过从转录水平对腈水解酶的异源表达进行调节，提高腈水解酶的正确折叠比例，增加可溶性表达，解除包涵体累积对菌体生长的抑制；对启动子突变株进行摇瓶诱导表达，菌体浓度、比酶活和发酵液比酶活分别比商品化质粒提高1.4倍、1.6倍和5.5倍；同时在催化制备加巴喷丁中间体1‑氰基环己基乙酸中的反应中；启动子突变株的催化效率较原菌株提高100％以上。
主权项：1.一种腈水解酶高效表达系统的构建方法，其特征在于,所述方法为：将构建于商品化载体pET-T7-nit重组腈水解酶表达质粒进行启动子置换，所选置换启动子选自T5启动子；其中，nit基因的核苷酸序列如SEQIDNO：1所示，nit基因表达的腈水解酶氨基酸序列如SEQIDNO：2所示。
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权利要求：
百度查询： 上海奥博生物医药股份有限公司 腈水解酶启动子优化表达及应用
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