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申请/专利权人：安徽工程大学
申请日：2022-07-18
公开（公告）日：2024-06-21
公开（公告）号：CN115948487B
主分类号：C12P17/02
分类号：C12P17/02;C12P41/00;C12N15/70;C12N15/62;C07K19/00;C12N9/14;C12N1/21;C12R1/19
优先权：
专利状态码：有效-授权
法律状态：2024.06.21#授权;2023.04.28#实质审查的生效;2023.04.11#公开
摘要：本发明涉及基因工程与酶工程技术领域，具体涉及一种利用环氧化物酶融合体制备R‑苄基缩水甘油醚的方法及应用，包括如下步骤：1将待手性拆分的外消旋苄基缩水甘油醚均匀溶解于有机溶剂中；2向步骤1所得的溶解有外消旋苄基缩水甘油醚的有机溶剂中加入水，经搅拌反应后，整个体系在反应期间保持均质的水包油型乳浊液；3待酶促反应结束后离心整个双相反应体系，使有机相与水相分层、细胞或酶沉淀，分取上层的有机相，经过滤、蒸发浓缩，得到R‑苄基缩水甘油醚。建立一种正辛烷水双相体系，使得初始底物浓度限较原单水相体系的不到100mmolL提升至400mmolL。
主权项：1.一种利用环氧化物酶融合体制备R-苄基缩水甘油醚的方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）将待手性拆分的外消旋苄基缩水甘油醚均匀溶解于有机溶剂中；（2）向步骤（1）所得的溶解有外消旋苄基缩水甘油醚的有机溶剂中加入水，所述水中含有环氧化物酶融合体和或悬浮有表达环氧化物酶融合体的工程菌细胞，经搅拌反应后，整个体系在反应期间保持均质的水包油型乳浊液；（3）待酶促反应结束后离心整个双相反应体系，使有机相与水相分层、细胞或酶沉淀，取上层的有机相，经过滤、蒸发浓缩，得到R-苄基缩水甘油醚；所述有机溶剂为正辛烷；有机相与水相的体积比小于1.0；加入的工程菌细胞的冻干质量与底物外消旋苄基缩水甘油醚物质的量的比例η不低于0.12mgμmol；反应体系中底物外消旋苄基缩水甘油醚的初始浓度为100~400mmolL；所述环氧化物酶融合体的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 安徽工程大学 一种利用环氧化物酶融合体制备(R)-苄基缩水甘油醚的方法及应用
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