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申请/专利权人：杭州师范大学
申请日：2024-04-25
公开（公告）日：2024-06-25
公开（公告）号：CN118243647A
主分类号：G01N21/31
分类号：G01N21/31;G01N21/33;G01N21/78
优先权：
专利状态码：在审-公开
法律状态：2024.06.25#公开
摘要：本发明公开一种利用超晶格辅助三色可视化试剂盒检测色氨酸的方法，利用色氨酸酶TnaA特异性催化L型色氨酸生成吲哚和丙酮酸。吲哚与对二甲氨基苯甲醛反应生成玫瑰红色的吲哚啉衍生物Rose‑Indole。丙酮酸在丙酮酸氧化酶的作用下可以生成双氧水，双氧水随即被具有类过氧化物酶性质的铂超晶格材料催化生成活性氧ROS，去氧化TMB生成蓝色的TMB+。两步显色反应的颜色复合，可以实现颜色从明度变化到色度变化的转变，有效提高裸眼识别的准确度。提出的这种比色方法在手性色氨酸的即时检测试剂盒方面应用前景广泛。
主权项：1.一种利用超晶格辅助三色可视化试剂盒检测色氨酸的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：步骤1、构建超晶格辅助三色可视化试剂盒在正辛酸中加入乙酰丙酮铂Ptacac2和六羰基钼MoCO6，通过自组装合成铂超晶格材料PtMALs，完成试剂盒的构建；步骤2、利用超晶格辅助三色可视化试剂盒检测色氨酸步骤2-1在PBs缓冲体系中，将底物L-色氨酸溶液和色氨酸酶溶液混合后孵育，得到混合溶液A；步骤2-2取混合溶液A，加入对二甲氨基苯甲醛DMABA溶液和盐酸，发生络合反应得到产物1溶液，利用紫外分光光度计测量吸收光谱，观察记录颜色结果；步骤2-3另取混合溶液A，加入丙酮酸氧化酶PoxB溶液、焦磷酸硫胺素TPP溶液和氯化镁溶液后孵育，再加入步骤1所得的PtMALs，得到混合溶液B；步骤2-4取混合溶液B，加入步骤1所得的PtMALs和TMB溶液孵育，发生氧化还原反应得到产物2溶液，利用紫外分光光度计测量吸收光谱，观察记录颜色结果；步骤2-5混合产物1溶液和产物2溶液，利用紫外分光光度计测量吸收光谱，观察记录颜色结果。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 杭州师范大学 一种利用超晶格辅助三色可视化试剂盒检测色氨酸的方法
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