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一种腺相关病毒储存方法 

申请/专利权人:丽山健康(山东)集团有限公司

申请日:2024-05-29

公开(公告)日:2024-06-25

公开(公告)号:CN118240775A

主分类号:C12N7/00

分类号:C12N7/00;C12R1/93

优先权:

专利状态码:在审-公开

法律状态:2024.06.25#公开

摘要:本发明涉及病毒储存技术领域,具体提供了一种腺相关病毒储存方法,所述腺相关病毒储存方法为:使用甘蔗茎、甜菜块根、甜菊叶和太子参主根提取物和特有的降温程序来储存AAV。本发明的植物提取物中的蔗糖、多糖、多酚和氨基酸等兼顾AAV的防冻、抑菌和氨基酸营养效果,配合本发明特有的工艺参数一起达到本发明的腺相关病毒储存中有效减少反复冻融和长期冻存时的病毒滴度的降低的效果。

主权项:1.一种腺相关病毒储存方法,其特征在于,所述腺相关病毒储存方法为:步骤一:取质量份数为12~18%的甘蔗茎、质量份数为18~25%的甜菜块根、质量份数为21~30%的甜菊叶、质量份数为10~15%的太子参主根和补足余量的质量浓度为85%的乙醇水溶液,放入闪式提取器,转速5400rmin提取36s后100目滤网过滤,得粗滤提取液;将所述粗滤提取液于73℃且真空度850mbar减压蒸馏至无液体连续流出,收集剩余液,加入pH为7.3的PBS缓冲液调节所述剩余液pH为7.2得植物提取物;步骤二:5℃下,将滴度为5×1013vgmL的腺相关病毒与质量为1.3~1.5倍所述腺相关病毒质量的所述植物提取物混合,移入程序降温仪配套的各5ml冻存管中后放入程序降温仪中,启动程序降温仪以-2℃min的降温速率将温度降至-1℃,以-5℃min的降温速率将温度降至-28℃,以-1℃min的降温速率将温度降至-80℃;步骤三:将冻存管移入-80℃冰箱,完成储存。

全文数据:

权利要求:

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