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申请/专利权人：上海领康时代生物技术有限公司
申请日：2024-02-28
公开（公告）日：2024-06-25
公开（公告）号：CN118240798A
主分类号：C12N9/14
分类号：C12N9/14;C12N9/12;C12N9/10
优先权：
专利状态码：在审-公开
法律状态：2024.06.25#公开
摘要：本发明提供一种牛痘病毒加帽酶纯化的方法，涉及牛痘病毒加帽酶加工技术领域，包括如下步骤：步骤A：将重组表达菌体进行破碎、离心过滤，收集上清；步骤B：将步骤A的过滤上清进行NI亲和层析捕获，得到洗脱样品；步骤C：将步骤B的洗脱样品采用阳离子层析进一步纯化；步骤D：将步骤C的洗脱样品采用疏水层析进一步纯化，SEC‑HPLC纯度符合预期；步骤E：将步骤D的洗脱样品经过超滤换液装置超滤换液后保存至保存液中。相较于市面上复杂、成本高的牛痘病毒加帽酶纯化方法，本发明优化了纯化步骤，样品SEC‑HPLC纯度大于90％，纯化总回收率明显提高，制备成本低。同时本发明的超滤装置进行了适应性改进，使得牛痘病毒加帽酶SEC‑HPLC纯度高，具有更广泛的应用前景。
主权项：1.一种牛痘病毒加帽酶纯化的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：步骤A：将重组表达菌体进行破碎、离心过滤，收集上清；步骤B：将步骤A的过滤上清进行NI亲和层析捕获，得到洗脱样品；步骤C：将步骤B的洗脱样品采用阳离子层析进一步纯化；步骤D：将步骤C的洗脱样品采用疏水层析进一步纯化，SEC-HPLC纯度符合预期；步骤E：将步骤D的洗脱样品经过超滤换液装置超滤换液后保存至保存液中。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 上海领康时代生物技术有限公司 一种牛痘病毒加帽酶纯化的方法
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