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申请/专利权人：广州医科大学附属第一医院(广州呼吸中心)
申请日：2021-10-12
公开（公告）日：2024-06-25
公开（公告）号：CN113862218B
主分类号：C12N5/071
分类号：C12N5/071;G01N33/574;C12Q1/02;A61K45/00;A61P35/00
优先权：
专利状态码：有效-授权
法律状态：2024.06.25#授权;2022.01.21#实质审查的生效;2021.12.31#公开
摘要：本发明属于生物技术领域，公开了一种肿瘤相关性血管周细胞亚群及制备方法与应用，所述肿瘤相关性血管周细胞亚群表达GJB2。本发明利用高维单细胞测序技术对浸润性肺腺癌患者的原发灶、转移阳性淋巴结和非转移淋巴结进行单细胞转录组分析并下游细胞功能学验证，首次揭示浸润性肺腺癌肿瘤微环境中存在独立的肿瘤相关性血管周细胞亚群，特异性表达PDGFRb+GJB2+CSPG4‑为“身份标签”，后经特征抗体流式纯化及免疫荧光鉴定，成功分选并扩增、保种该亚群，进一步细胞功能学验证其可显著促进肺癌细胞的侵袭能力，并具有幼稚化、畸形的血管形成能力，是领域内研究肺癌肿瘤血管异常机制和靶向血管正常化药物的理想细胞工具。
主权项：1.一种血管周细胞亚群，其特征在于，所述血管周细胞表达GJB2，所述血管周细胞亚群的“身份标签”为PDGFRb+GJB2+CSPG4-；所述血管周细胞亚群高表达EMT核心转录因子TWIST1；所述血管周细胞亚群由包括以下步骤制备得到：将肿瘤组织与消化液混合，消化，重悬，加入结合剂，所述结合剂与GJB2基因或其表达产物相结合，分选与所述结合剂结合的周细胞，得到血管周细胞亚群；所述消化液由1640培养基与消化酶混合制成；所述消化酶包括DispaseII、CollagenaseI、CollagenaseIV和DNaseI；所述结合剂选自配体、酶和或抗体；所述分选包括通过荧光激活细胞分选、磁性细胞分选、底物辅助细胞分选、激光介导切割、荧光测定法、流式细胞术或显微技术进行分选；所述肿瘤组织为肺癌组织。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 广州医科大学附属第一医院(广州呼吸中心) 一种肿瘤相关性血管周细胞亚群及制备方法与应用
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