申请/专利权人：润科生物工程(福建)有限公司

申请日：2021-12-06

公开（公告）日：2024-06-25

公开（公告）号：CN114164048B

主分类号：C12P7/64

分类号：C12P7/64;C11B3/00;C11B3/02;C11B3/04;C11B3/12

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.06.25#授权;2022.03.29#实质审查的生效;2022.03.11#公开

摘要：一种高含量DHA油脂的制取方法，包括下述步骤：（1）制取DHA脂肪酸：（1‑1）藻油皂化，（1‑2）酸化，（1‑3）水洗，（1‑4）脲包纯化，得到DHA脂肪酸；（2）制取DHA单甘脂：（2‑1）藻油单甘脂化，（2‑2）分子蒸馏，采用分子蒸馏法对步骤（2‑1）的反应产物进行油脂分离，得到DHA单甘脂；（3）酯化；将步骤（1）得到的DHA脂肪酸与步骤（2）得到的DHA单甘脂以3:1‑5:1的重量比例混合，然后加入到填充有固定化脂肪酶的固定化酶柱中，在温度45‑55℃的条件下反应2‑4小时；（4）分子蒸馏，采用分子蒸馏法对步骤（3）的反应产物进行油脂分离，得到高含量DHA油脂。本发明反应时间较短，生产效率较高，产物得率较高，还能提高最终产物中DHA甘油三酯的含量。

主权项：1.一种高含量DHA油脂的制取方法，其特征在于包括下述步骤：（1）制取DHA脂肪酸（1-1）藻油皂化向藻油中加入水和氢氧化钠，水与藻油的重量比例为1:1-1:3，氢氧化钠的加入量为藻油重量的10-15%，在充氮的条件下进行皂化反应，皂化反应的反应温度为75-85℃，反应时间3-6小时；然后静置1-2小时使皂化反应产物分层，排干下层的水后得到皂液；步骤（1-1）所使用的藻油，其甘油三酯Sn-2位的DHA占DHA总量的70%以上；（1-2）酸化向步骤（1-1）得到的皂液中加入过量的硫酸或磷酸，进行酸化反应，得到脂肪酸粗液；步骤（1-2）中，在充氮的条件下进行酸化反应，酸化反应的反应温度为75-85℃，反应时间为1-2小时；（1-3）水洗将步骤（1-2）得到的脂肪酸粗液加入到水洗罐中，加水进行水洗，水洗结束后静置，再将上层的脂肪酸与下层的水分离，得到脂肪酸；步骤（1-3）中，水洗的方法是：向步骤（1-2）获得脂肪酸粗液中加入重量为其0.3-1倍的水，然后在充氮的条件下搅拌10-30分钟；（1-4）脲包纯化将步骤（1-3）得到的脂肪酸加入到尿素溶液中，然后在70-80℃的条件下搅拌0.5-2小时；停止搅拌后自然冷却至室温，然后在0-8℃的低温静置0.5-2小时；静置结束后进行真空抽滤，收集滤液并将乙醇脱去；然后采用水洗分液法对滤液进行纯化，分离得到的上层液体即为所需的DHA脂肪酸；（2）制取DHA单甘脂（2-1）藻油单甘脂化向藻油中添加水，水的添加量为藻油重量的5-10%，混合均匀后得到第一混合物料；然后将第一混合物料加入到填充有固定化脂肪酶的固定化酶柱中，在温度50-55℃的条件下反应2-4小时；步骤（2-1）所使用的藻油，其甘油三酯Sn-2位的DHA占DHA总量的70%以上；步骤（2-1）采用的固定化脂肪酶为固定化脂肪酶LipozymeRMIM；步骤（2-1）中，第一混合物料在固定化酶柱中的流速为200-1000Lh；（2-2）分子蒸馏采用分子蒸馏法对步骤（2-1）的反应产物进行油脂分离：先在分子蒸馏进料量为100-300Lh、蒸馏温度为140-160℃、真空度为1-10pa的条件下对步骤（2-1）的反应产物进行第一次分子蒸馏；然后在分子蒸馏进料量为100-300Lh、蒸馏温度为125-135℃、真空度为1-10pa的条件下对第一次分子蒸馏所得轻相再次进行第二次分子蒸馏，所得重相即为所需的DHA单甘脂；（3）酯化将步骤（1）得到的DHA脂肪酸与步骤（2）得到的DHA单甘脂以3:1-5:1的重量比例混合，然后加入到填充有固定化脂肪酶的固定化酶柱中，在温度45-55℃的条件下反应2-4小时；步骤（3）采用的固定化脂肪酶为固定化脂肪酶435或固定化脂肪酶TL；步骤（3）中，DHA脂肪酸与DHA单甘脂的混合物在固定化酶柱中的流速为200-1000Lh；（4）分子蒸馏采用分子蒸馏法对步骤（3）的反应产物进行油脂分离，获得所需的高含量DHA油脂；步骤（4）中，在分子蒸馏进料量为100-300Lh、蒸馏温度为155-175℃、真空度为1-10pa的条件下对步骤（3）的反应产物进行第一次分子蒸馏，收集重相；然后在分子蒸馏进料量为100-300Lh、蒸馏温度为155-175℃、真空度为1-10pa的条件下对第一次分子蒸馏所得重相进行第二次分子蒸馏，所得重相即为所需的高含量DHA油脂。

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