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申请/专利权人：吉林农业大学
摘要：本发明公开了一种检测金顶侧耳杂交菌株细胞质来源的引物设计方法、引物及其应用，涉及生物技术领域。所述引物包括，上游引物MT‑S5‑F的核苷酸序列为：5’‑AGCGTTAACACACCCCC‑3’；下游引物MT‑S5‑R的核苷酸序列为：5’‑CTGAAAATGCAGACCCG‑3’。本发明设计出了特异性鉴定引物MT‑S5，能够通过DNA体外扩增后观察电泳条带结果对比参照鉴定出金顶侧耳杂交菌株的细胞质究竟来源哪一方亲本，为优良杂交后代的快速筛选鉴定提供了极大的便利。通过明确杂交菌株的细胞质来源，将金顶侧耳杂交育种中引入父母本鉴别的方法，不仅能够明确金顶侧耳杂交过程中的父母本构成以及细胞质遗传规律，更能够为其他食用菌的遗传育种提供一定借鉴思路，有利于分析杂交菌株的遗传构成，进而有利于对优良亲本的筛选确认。
主权项：1.一种检测金顶侧耳杂交菌株细胞质来源的引物设计方法，其特征在于，包括如下步骤：S1金顶侧耳菌丝培养与DNA提取:将金顶侧耳单核杂交亲本、杂交菌株培养至满板后，刮取菌丝，提取基因组DNA；S2金顶侧耳线粒体基因组重测序：将菌丝基因组DNA进行线粒体基因组重测序，检测对比至线粒体参考基因组的变异情况；S3金顶侧耳差异位点分析：查看线粒体基因组中的所有变异检测信息，挑选出适用于两亲本之间的共有变异种类，并以此为根据定位变异类型；S4金顶侧耳差异位点引物设计：基于线粒体基因组重测序数据中变异位点信息，通过相互对比单核杂交亲本之间的变异位点，在线粒体参考基因组中选择差异位点上下游各200bp序列，设计待筛选引物；S5金顶侧耳杂交菌株细胞质鉴定的引物：将S4中设计的所有待筛选引物分别以单核亲本菌株的DNA为模板进行扩增，挑选能够明显观察到两单核亲本扩增产物分子量不同的引物，即得到能够区分金顶侧耳杂交菌株细胞质来自哪个单核亲本的鉴定引物。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 吉林农业大学 检测金顶侧耳杂交菌株细胞质来源的引物设计方法、引物及其应用
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