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申请/专利权人：云南省农业科学院药用植物研究所;双江鼎云茶业有限公司;云南植虫药生物科技有限公司

摘要：本发明涉及种质资源保护与利用技术领域，具体涉及一种滇黄精种质资源离体保存方法及应用，包括：前处理培养；种质保存培养和复壮培养；本发明采用短时低温处理，同时配合ABA、甘露醇以及降低MS中的氮和钙的浓度，提高磷、钾、镁的浓度以及降低糖的浓度，可使滇黄精在常温下保存过程中，新陈代谢速度降缓，再结合MS、NAA、TDZ、6‑BA、GA3组合的复壮培养基，能促使再需要进行生产扩繁时，能迅速获得大量苗。本发明单次保存周期最长可为8个月，与现有保存技术的2个月内必须进行一次接种操作相比，简化了操作流程，降低了保存成本。

主权项：1.滇黄精种质资源离体保存方法，其特征在于，步骤包括：（1）前处理培养：无菌芽接种于前处理培养基中，23～27℃条件下、光照强度2000～3000lx，单日光照时间10h进行光暗交替培养15～20天；所述前处理培养基的配方为：12MS培养基+蔗糖10～15gL+甘露醇6～8gL；（2）种质保存培养：将前处理培养的无菌芽去叶后，接种于种质保存培养基中，先4～8℃低温、全黑暗处理24～36h，后置于23～27℃条件下、光照强度2000～3000lx，单日光照时间8h进行光暗交替培养；所述种质保存培养基的配方为：改良MS培养基+ABA0.8～1.0mgL+蔗糖15～20gL+甘露醇25～30gL；所述改良MS培养基配方为：硝酸铵浓度为0.20gL，磷酸二氢钾浓度为0.50gL，硝酸钾浓度为0.47gL，二水氯化钙浓度为0.11gL；（3）复壮培养：种质保存培养以后无菌芽接种于复壮培养基中，在23～27℃条件下、光照强度2000～3000lx，单日光照时间12h进行光暗交替培养30～40天；所述复壮培养基的配方为：MS培养基+NAA0.02～0.05mgL+TDZ2.0～3.0mgL+6-BA2.0～3.0mgL+GA31.2～2.5mgL+蔗糖30gL。

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