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用于评估抗生素对革兰氏阴性菌外膜作用的超分辨光学成像方法 

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申请/专利权人:上海大学

摘要:一种基于单分子定位法的超分辨光学成像方法,用以评估抗生素对革兰氏阴性菌外膜作用能力,包括:将细菌固定至盖玻片表面;向样品中加入荧光探针和抗生素,通过基于单分子定位法的超分辨光学显微镜每隔一段时间进行成像;对相机采集的原始数据进行分析,发现细菌的内膜上单分子荧光标记的数量逐渐增多,且荧光标记的空间分布呈现不均匀变化;当内膜上的荧光标记数量达到平衡,荧光标记空间分布趋于均匀,确认外膜被完全破坏。本发明解决了目前临床上耐药性感染的抗生素敏感性检测存在耗时长、宏观培养缺乏单细菌信息等问题,为在亚细胞尺度观测细菌对抗生素的反应提供了一种操作简单、通用性强、耗时短的新方法。

主权项:1.一种用于评估抗生素对革兰氏阴性菌外膜作用的超分辨光学成像方法,其特征在于,包括如下步骤:S1.将细菌样品固定至盖玻片表面,并向细菌样品中加入荧光探针,该荧光探针与所述革兰氏阴性菌外膜结合时发荧光;S2.加入抗生素后,每隔一段时间通过基于单分子定位法的超分辨光学显微镜进行成像;S3.使用开源图像分析平台ImageJ的ThunderSTORM插件分析步骤S2的图像,发现细菌的内膜上单分子荧光标记的数量逐渐增多,且荧光标记的空间分布呈现不均匀变化;当内膜上的荧光标记数量达到平衡,荧光标记空间分布趋于均匀,即确认外膜被完全破坏。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 上海大学 用于评估抗生素对革兰氏阴性菌外膜作用的超分辨光学成像方法

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