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申请/专利权人：西湖大学

摘要：本发明涉及光纤生物传感技术领域，公开了一种小分子药物血药浓度的检测方法。本发明提供的小分子药物血药浓度的检测方法，包括制备光纤探针、分别获得参照样本和待测样本、参照样本的竞争性结合和信号放大、获得“小分子药物浓度‑相对抑制性”标准曲线、待测样本的竞争性结合和信号放大、获得待测样本的小分子药物浓度等步骤。本发明基于光纤生物膜干涉技术、直接竞争性结合免疫法与信号放大策略，针对小分子药物的血药浓度建立了一种快速、高灵敏的光纤生物传感检测技术。

主权项：1.一种小分子药物血药浓度的检测方法，其特征在于，包括：1制备光纤探针：将生物素化的特异性小分子药物单克隆抗体固定至链霉亲和素光纤的表面，得到光纤探针，所述小分子药物选自卡马西平、氨茶碱、华法林、奎尼丁、甲氨蝶呤、环孢素、万古霉素、地高辛或小分子抗病毒药物；2分别获得参照样本和待测样本：将不同浓度的小分子药物标准品添加到血液对照品中，得到若干个具有不同小分子药物浓度的参照样本；获取小分子药物血药浓度待测者的血液样本，得到待测样本；3参照样本的竞争性结合和信号放大：将所述若干个具有不同小分子药物浓度的参照样本分别与小分子药物-辣根过氧化物酶偶联物等体积混合，得到若干个参照样本与小分子药物-辣根过氧化物酶偶联物的混合液，对所述若干个参照样本与小分子药物-辣根过氧化物酶偶联物的混合液进行如下竞争性结合和信号放大步骤：竞争性结合：使所述光纤探针接触所述参照样本与小分子药物-辣根过氧化物酶偶联物的混合液，参照样本中的小分子药物和小分子药物-辣根过氧化物酶偶联物竞争性地与所述光纤探针上的特异性小分子药物单克隆抗体结合；信号放大：然后使所述光纤探针接触辣根过氧化物酶生物显色剂，结合于所述光纤探针上的辣根过氧化物酶与所述辣根过氧化物酶生物显色剂高亲和力结合，产生金属沉淀，带来光纤表面的光谱红移，得到参照样本的光谱位移；4获得“小分子药物浓度-相对抑制性％”标准曲线：以参照样本中小分子药物的浓度为X轴，以相对抑制性为Y轴，绘制“浓度-相对抑制性％”非线性标准曲线；其中，不同小分子药物浓度的参照样本的相对抑制性的计算以零小分子药物浓度的参照样本的光谱位移为参照，公式如下：某小分子药物浓度的参照样本的相对抑制性％＝{1–某小分子药物浓度的参照样本的光谱位移零小分子药物浓度的参照样本的光谱位移}×100％；5待测样本的竞争性结合和信号放大：将所述待测样本与小分子药物-辣根过氧化物酶偶联物等体积混合，得到待测样本与小分子药物-辣根过氧化物酶偶联物的混合液，对所述待测样本与小分子药物-辣根过氧化物酶偶联物的混合液进行如下竞争性结合和信号放大步骤：竞争性结合：使所述光纤探针接触所述待测样本与小分子药物-辣根过氧化物酶偶联物的混合液，待测样本中的小分子药物与小分子药物-辣根过氧化物酶偶联物竞争性地与所述光纤探针上的特异性小分子药物单克隆抗体结合；信号放大：然后使所述光纤探针接触辣根过氧化物酶生物显色剂，结合于所述光纤探针上的辣根过氧化物酶与所述辣根过氧化物酶生物显色剂高亲和力结合，产生金属沉淀，带来光纤表面的光谱红移，得到待测样本的光谱位移；6获得待测样本的小分子药物浓度：计算待测样本的相对抑制性％：待测样本的相对抑制性％＝{1–待测样本的光谱位移零小分子药物浓度的参照样本的光谱位移}×100％；根据所述待测样本的相对抑制性％，基于所述“小分子药物浓度-相对抑制性％”非线性标准曲线得出待测样本中的小分子药物浓度。

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百度查询： 西湖大学 一种小分子药物血药浓度的检测方法