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申请/专利权人:中山大学附属第六医院
摘要:本发明属于生物医药领域,涉及一种DNA文库及其构建方法和应用。本发明提供的DNA文库的制备方法,包括步骤:使用两个接头,所述接头中的第一DNA接头连接在DNA双链的一侧端,所述接头的第二DNA接头连接在双链的另一侧端;从而将所述DNA双链的正链和负链连接在一条链上成单链环形或U形;或者用二个DNA接头混合,将双链DNA连接成环形DNA;连接产物作为引物延伸的模板,用基因特异性引物进行目的基因延伸和富集,然后进行PCR,获得所述的目标DNA文库。或用基因特异性探针杂交,获得所述的目标DNA文库。本发明的方法既可以提高检测基因突变的灵敏度、特异性,还可以在同一个反应体系大规模的富集多个含突变的基因,将极低频率的基因突变富集数十倍。
主权项:1.一种DNA文库的制备方法,其特征在于,包括步骤:使用两个DNA接头,所述DNA接头中的第一DNA接头连接在DNA双链的一侧端,所述接头的第二DNA接头连接在DNA双链的另一侧端;从而将所述DNA双链的正链和负链连接在一条链上形成单链环形或U形的初级DNA文库,当以所述初级DNA文库为模板进行PCR时,引物延伸所述的初级DNA文库获得目标DNA文库。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 中山大学附属第六医院 一种DNA文库及其构建方法及其应用
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