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细胞分子的原位组合标记 

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申请/专利权人:华盛顿大学

摘要:提供了独特地标记或条形编码细胞核、多个细胞核、细胞、多个细胞和或组织内的分子的方法。还提供了用于独特地标记或条形编码细胞核、多个细胞核、细胞、多个细胞和或组织内的分子的试剂盒。待标记的分子可以包括但不限于RNA和或cDNA。

主权项:1.一种独特地标记多个细胞内的RNA分子的方法,所述方法包括:a在步骤b之前固定和透化第一多个细胞,其中在约8℃以下固定和透化所述第一多个细胞;b逆转录所述第一多个细胞内的RNA分子以在所述第一多个细胞内形成互补DNAcDNA分子,其中逆转录所述RNA分子包括将逆转录引物偶联到所述RNA分子,其中所述逆转录引物包含聚T序列或随机序列中的至少一种;c将所述包含cDNA分子的第一多个细胞分成至少两个初级等分试样,所述至少两个初级等分试样包括第一初级等分试样和第二初级等分试样;d向所述至少两个初级等分试样提供初级核酸标签,其中向所述第一初级等分试样提供的初级核酸标签不同于向所述第二初级等分试样提供的初级核酸标签;e将所述至少两个初级等分试样中的每一个内的cDNA分子与所提供的初级核酸标签偶联;f合并所述至少两个初级等分试样;g将所述合并的初级等分试样分成至少两个次级等分试样,所述至少两个次级等分试样包括第一次级等分试样和第二次级等分试样;h向所述至少两个次级等分试样提供次级核酸标签,其中向所述第一次级等分试样提供的次级核酸标签不同于向所述第二次级等分试样提供的次级核酸标签;i将所述至少两个次级等分试样中的每一个内的cDNA分子与所提供的次级核酸标签偶联;j合并所述至少两个次级等分试样;k裂解所述第一多个细胞的所述合并的至少两个次级等分试样以从所述第一多个细胞内释放cDNA分子,以形成裂解物;和1向所述裂解物添加蛋白酶抑制剂和结合剂,以使所述cDNA分子结合结合剂。

全文数据:

权利要求:

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