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靶向非病毒DNA插入 

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申请/专利权人:加利福尼亚大学董事会

摘要:本文提供了用于编辑细胞基因组的方法和组合物。在一些实施方式中,将长度为至少200个核苷酸的核苷酸序列插入细胞基因组中的靶区域。

主权项:1.一种编辑细胞基因组的方法,所述方法包括:a提供Cas9核糖核蛋白复合物RNP-DNA模板复合物,其包含:i所述RNP,其中所述RNP包含Cas9核酸酶结构域和向导RNA,其中所述向导RNA与所述细胞基因组的靶区域特异性地杂交,并且其中所述Cas9核酸酶结构域切割所述靶区域以在所述细胞的基因组中产生插入位点;和ii双链或单链DNA模板,其中所述DNA模板的大小大于约200个核苷酸,其中所述DNA模板的5'和3'端包含与侧接所述插入位点的基因组序列具有同源性的核苷酸序列,并且其中所述复合物中RNP与DNA模板的摩尔比为约3:1至约100:1;和b将所述RNP-DNA模板复合物导入细胞。

全文数据:

权利要求:

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