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嵌合质粒文库的构建方法 

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申请/专利权人:国立大学法人神户大学

摘要:本发明的课题为提供能够高效地构建长链DNA的组合文库、容易确认所得克隆的基因型的新型微生物细胞转化用DNA片段制备方法。本发明为微生物细胞转化用DNA片段的制备方法,其中,所述微生物细胞转化用DNA片段具有至少1个插入DNA单元,所述插入DNA单元包含含有在宿主微生物中有效的复制起点的DNA、和单位DNA连接而成的插入DNA,所述方法的特征在于包括下述步骤:步骤A,通过OGAB方法制备多种含有插入DNA单元的质粒,所述插入DNA单元是使能够以特定的连接顺序进行连接的多种单位DNA连接而成的;步骤B,将通过步骤A制备的多种质粒用适合各质粒的限制性内切酶处理,分解为单位DNA,制备多种单位DNA混合液;和步骤C,使用通过步骤B得到的多种单位DNA混合液,通过OGAB法重新组装单位DNA,制备长链DNA片段。

主权项:1.DNA片段的制备方法,其中,所述DNA片段具有至少1个插入DNA单元,所述插入DNA单元包含含有在宿主中有效的复制起点的DNA、和单位DNA连接而成的插入DNA,所述制备方法的特征在于包括下述步骤:步骤A,将多种含有使能够以特定的连接顺序进行连接的多种单位DNA连接而成的插入DNA单元的质粒用适合各质粒的限制性内切酶处理,分解为多种单位DNA,制备多种单位DNA混合液;和步骤B,使用通过步骤A得到的多种单位DNA混合液,通过OGAB法重新组装多种单位DNA,制备长链DNA片段。

全文数据:

权利要求:

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