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一种基于常温Argonaute蛋白的多重核酸免扩增数字化编码-解码检测方法 

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申请/专利权人:大连工业大学

摘要:本发明公开了一种基于常温Argonaute蛋白的多重核酸免扩增数字化编码‑解码检测方法,属于核酸分子检测领域。该方法包括待测目标物的DNA提取、常温Argonaute酶介导的双引导DNA精准切割靶标、基于酪胺体系对纳米磁颗粒表面进行快速的位点扩增、生物素修饰的荧光基团对纳米磁颗粒进行编码、以及基于人工智能的数字化读出算法。本发明克服了传统数字方法的局限性,包括繁琐的操作和耗时的过程,提供了一种简单、快速、用户友好和单酶介导的多重数字化核酸分子检测方法。

主权项:1.一种检测靶标核酸分子的方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:1发光纳米磁颗粒的制备:将Argonaute酶依次与引导DNA、待测核酸样本、核酸探针、纳米磁颗粒偶联物混合孵育,得到荧光编码的纳米磁颗粒,清洗,分散于水溶液,得到含有发光纳米磁颗粒的溶液;2算法解码:将步骤1所得含有发光纳米磁颗粒的溶液进行荧光显影,得到显影图像,利用人工智能算法处理所得显影图像,根据显影图像上发光纳米磁颗粒的荧光个数,输出待测靶标核酸分子浓度信息;所述引导DNA包括:引导DNA1、引导DNA2;所述引导DNA1、引导DNA2靶向结合所述靶标核酸分子,并且,所述的引导DNA1、引导DNA2在所述靶标核酸分子上的结合位点相邻且无间隔序列;所述核酸探针上修饰了荧光基团、生物素和淬灭基团;所述纳米磁颗粒偶联物为:表面依次修饰了酪氨、链霉亲和素的纳米磁颗粒;所述Argonaute酶通过所述引导DNA靶向靶标核酸分子,对靶标核酸分子进行切割,产生二级导向DNA,所述二级导向DNA与所述核酸探针至少部分反向互补。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 大连工业大学 一种基于常温Argonaute蛋白的多重核酸免扩增数字化编码-解码检测方法

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