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一种尿液外泌体的提取方法及应用 

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申请/专利权人:中国人民解放军总医院第一医学中心

摘要:本发明涉及生物技术领域,尤其涉及一种尿液外泌体的提取方法及应用。提取方法包括以下步骤:取尿液样本,于1~10℃条件下进行第一次离心后于‑75℃~‑85℃冻存;将冰冻样本于20~28℃解冻后进行第二次离心,收集上清;取上清采用孔径为0.22μm过滤膜进行过滤后,在1~10℃条件下进行共三次离心,离心力为180,000×g~220,000×g,沉淀重悬后获得尿液外泌体。本发明的尿液外泌体的提取方法可有效降低高丰度蛋白与尿外泌体共沉淀,更适用于具有高丰度白蛋白的肾病患者尿液标本,有效提高了尿液外泌体的纯度,降低了高丰度蛋白与尿液外泌体共沉淀的干扰。

主权项:1.一种尿液外泌体的提取方法,其特征在于,包括以下步骤:S1、取尿液样本,于1℃~10℃条件下进行第一次离心后于-75℃~-85℃冻存;将冰冻样本于20℃~28℃解冻至全部成为液体;S2、将解冻后的液体于1℃~10℃条件下进行第二次离心,收集上清;S3、取上清采用孔径为0.22μm过滤膜进行过滤,收集滤液;S4、将所述滤液于1℃~10℃条件下第三次离心,弃上清液;S5、用缓冲溶液重悬沉淀,于1℃~10℃条件下进行第四次离心,弃去上清液;S6、用缓冲溶液重悬沉淀,于1℃~10℃条件下进行第五次离心,弃上清液,沉淀重悬后获得尿液外泌体。

全文数据:

权利要求:

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