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申请/专利权人：东北农业大学

摘要：本发明属于食品蛋白质加工技术领域，具体涉及一种用于槲皮素包埋的复合乳液的制备方法，该方法通过优化乳液的各组分配方，确定最佳组成比例，构建了一种用于槲皮素包埋的复合乳液，经过包埋的槲皮素能够在模拟胃液中被缓释，在模拟肠液中的释放量高达69％，同时被包埋后乳液的抗氧化性也有所提高，说明蛋白‑‑甘草酸复合乳液对槲皮素有明显的保护作用。

主权项：1.一种用于槲皮素包埋的复合乳液的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：1用0.05moLL，pH＝7.0的PBS溶解β-酪蛋白、α-乳清蛋白和β-乳球蛋白分别配制成浓度为1％、2％、3％的蛋白溶液，再以蛋白溶液为水相与大豆油按体积比7：1、9：1和11：1，使用高速均质机在12000rpm下均质3次，每隔1分钟均质一次，每次均质2分钟，即制得空白蛋白乳液；将甘草酸作为乳化剂分别以1％、2％和3％的浓度加入到三种蛋白溶液中，用上述相同的均质方法制备出蛋白甘草酸复合乳液，优化乳液的最佳配方；2将步骤1得到的最佳配方：用0.05moLL，pH＝7.0的PBS溶解β-酪蛋白、α-乳清蛋白和β-乳球蛋白配制成浓度为2％的蛋白溶液，甘草酸的最佳添加量为2％；将槲皮素溶于大豆油中，使槲皮素浓度为1mgmL，使用磁力搅拌器，在常温下搅拌一个小时；三种蛋白与甘草酸复合溶液与大豆油的体积比为9：1，使用高速均质机在12000rpm下每隔1分钟均质一次，每次均质2分钟，制备出包载槲皮素的蛋白甘草酸复合乳液，制得的复合乳液在4℃下储存；3通过测量槲皮素在乳液中游离的含量来确定包封率，将槲皮素乳液稀释100倍后于375nm处测量紫外吸光度值，由已知浓度的槲皮素制备的标准曲线来确定测试样品中的槲皮素含量，使用以下公式计算包封率EE：Cfree是槲皮素在外部水相中的游离量，Ctotal是添加到乳液中中的槲皮素的初始总量；4抗氧化能力的测定，取100μL样品1mgmL与100μLDPPH反应液加到96孔酶标板中，避光反应30min，于517nm处测OD值。以200μL95％vv乙醇水溶液为空白，100μL95％vv乙醇水溶液与100μLDPPH反应液为对照。按下述公式计算DPPH自由基清除率：A1为空白组OD值，A2为对照组OD值，A3为样品测定的OD值；5体外释放特性，用体外消化系统模型来模拟乳液在胃肠道中的消化过程，探究功能性因子槲皮素在消化过程中的稳定性，在去离子水40ml中加入胃蛋白酶0.128g和NaCl0.08g，使其充分溶解；用HCl1molL将混合溶液的pH值调整为1.2得到模拟胃液，模拟胃液与乳液1：1混合，然后调整其pH至2，将混合液在37℃振荡箱中以100次min速度振荡1h，在消化时间分别在0、10、20、30、50、60min取等份消化后溶液，迅速调溶液的pH至7使胃蛋白酶灭活；模拟肠消化：胃消化后，将消化液与模拟肠液以1：3混合，在去离子水中加入CaCl210mM、NaCl150mM、牛胆盐提取物8mgmL和牛胰酶6mgmL得到模拟肠液，将混合液的pH值调至7.0，在37℃震荡箱中以100rpm的速度振荡2h，分别在0、12、24、36、48、60、72、84、96、108、120min取等份肠消化后的溶液调节pH至4-5进行灭酶，对照组为游离的槲皮素，用相同方法处理，灭酶后分析槲皮素的释放率；6生物利用率，取消化后样品于3000g下离心15min，收集中间胶束层，经乙醇稀释后于375nm处测定OD值，利用下述公式测定生物利用率：BA为生物利用率，Cmicelle为胶束层中槲皮素的吸光度值，Cdigesta为消化液中初始槲皮素的吸光度值。

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