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申请/专利权人:中国科学院基础医学与肿瘤研究所(筹)
摘要:本申请涉及分析化学领域,特别涉及一种生物样品中蛋白的检测分析方法。该检测分析方法包括如下步骤:孵育纳米颗粒与生物样品中的蛋白形成蛋白‑纳米颗粒复合物,将所述蛋白‑纳米颗粒复合物中的蛋白制备成相应的多肽混合物;以及,通过采用液相色谱‑质谱法对所述多肽混合物进行检测并对所得检测数据进行分析以实现对所述生物样品中所述蛋白的检测分析。相对于传统技术,本申请的有益效果包括:针对传统技术的不足,本申请建立了基于纳米蛋白冠的组织蛋白质组学新方法,该方法不仅拓展了样品的覆盖度。而且,该方法方便简单,节省时间成本和人力成本,在未来蛋白组学研究中具有一定的前景。
主权项:1.一种生物样品中蛋白的检测分析方法,其特征在于,所述检测分析方法包括如下步骤:孵育纳米颗粒与生物样品中的蛋白形成蛋白-纳米颗粒复合物,将所述蛋白-纳米颗粒复合物中的蛋白制备成相应的多肽混合物;以及,通过采用液相色谱-质谱法对所述多肽混合物进行检测并对所得检测数据进行分析以实现对所述生物样品中所述蛋白的检测分析;所述生物样品为实体组织样品,所述液相色谱-质谱法满足液相色谱条件1,所述液相色谱条件1包括:固定相1为C18色谱柱,规格为75μm×25cm,2μm;流动相1包括流动相A1和流动相B1,所述流动相A1为甲酸和水的混合物,所述流动相A1中甲酸的体积占比为0.08%-0.12%,所述流动相B1为甲酸和乙腈的混合物,所述流动相B1中甲酸的体积占比为0.08%-0.12%;采用梯度洗脱的方式,洗脱程序包括:0min-1min,所述流动相B1的体积占比从2%线性增加到6%;1min-58min,所述流动相B1的体积占比从6%线性增加到26%;58min-60min,所述流动相B1的体积占比从26%线性增加到80%;60min-65min,所述流动相B1的体积占比保持80%;所述生物样品为液体样品,所述液相色谱-质谱法满足液相色谱条件2,所述液相色谱条件2包括:固定相2为C18色谱柱,规格为75μm×2cm,3μm;流动相2包括流动相A2和流动相B2,流动相A2为水;流动相B2为乙腈水溶液,所述流动相B2中乙腈的体积占比为80%;采用梯度洗脱的方式,洗脱程序包括:0min-1min,所述流动相B2的体积占比从3%增加到7%;1min-51min,所述流动相B2的体积占比从7%增加到28%;51min-61min,所述流动相B2的体积占比从28%增加到45%;61min-63min,所述流动相B的体积占比从45%增加到95%;保持所述流动相B2的体积占比为95%16min。
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