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申请/专利权人：苏州东之睿生物科技有限公司
摘要：本发明公开了一种采用流式细胞法检测特异性微小淋巴细胞亚群的方法，涉及细胞检测技术领域，通过免疫组化的方法使流式细胞法可以标记出表达特异性抗原的淋巴细胞，从而细分出它们当中特异性微小淋巴细胞亚群。使用这种方法，可以更准确地识别和检测出淋巴细胞亚群，从而提高了试验数据的准确性，为后续的治疗监测研究提供了更专业准确的数据。
主权项：1.一种采用流式细胞法检测特异性微小淋巴细胞亚群的方法，其特征在于，所述采用流式细胞法检测特异性微小淋巴细胞亚群的方法包括以下步骤：S1：采集100μL的全血或骨髓到无菌的EDTA抗凝样本管中，于室温中静置5～10min后进行免疫标记反应；S2：溶液配制：6％多聚甲醛，1.2％TritonX-100，30％聚乙烯吡咯烷酮储存溶液和0.5μgmL4',6-二脒基-2-苯基吲哚均用PH范围为7.2-7.4的0.01molL磷酸盐溶液稀释；S3：在样本管中加0.2％EDTA液5ml,室温放置30min,捞出组织加EDTA胰酶液5～10ml,37水浴消化30min,其间每5～10min吹打振荡1次；S4：350目尼龙网过滤离心收集细胞,按1：1与培养基混匀，加刺激剂4ml，加溶液1ml同时加蛋白转运抑制剂，混匀后，置于37℃，5％二氧化碳培养4-6小时；S5：加入溶血素，室温暗处孵育10分钟；使用离心机控制离心速度为500g的情况下离心处理5分钟，弃上清；S6：加固定剂10～～15ml，室温暗处孵育15分钟，再使用离心机控制离心速度为500g的情况下离心处理5分钟，弃上清；S7：将细胞重悬于200μL缓冲液中，上流式细胞仪检测。
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权利要求：
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