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申请/专利权人：南京师范大学
摘要：本发明涉及微生物筛选技术，公开了一种基于双乳液体系的高通量筛选微生物菌株的方法及其应用。该方法包括：建立微生物突变体库，构建微流控双乳液芯片；利用微流控双乳液芯片对微生物突变体库中的菌株进行包埋形成双乳液液滴，液滴的内相含有微生物突变体库菌株的培养液与具有生物相容性的溶液的混合物、中间相含有能够特异性结合目标产物的靶标结合元件、外相为含有表面活性剂的氟化油；将双乳液液滴固化成核壳微球后进行培养，利用微球中靶标结合元件与目标产物结合形成指示信号，以对微球进行微流控分选。该高通量筛选方法保证了菌株生长的环境，筛选信号稳定准确，大大提高了筛选的精确性，且适用于小分子有机物的检测。
主权项：1.一种基于双乳液体系的高通量筛选高产脱落酸的灰葡萄孢霉菌株的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：S1、建立微生物突变体库，构建微流控双乳液芯片；S2、利用微流控双乳液芯片对所述微生物突变体库中的菌株进行包埋形成双乳液液滴，其中，所述液滴的内相含有所述微生物突变体库菌株的培养液与具有生物相容性的溶液的混合物，中间相含有能够特异性结合目标产物的靶标结合元件、光引发剂和凝胶剂，外相为含有表面活性剂的氟化油，所述内相的流速为0.1-0.2mLh，所述中间相的流速为0.2-0.4mLh，所述外相的流速为1-3mLh，所述具有生物相容性的溶液选自甲基纤维素水溶液、纤维素纳米晶水溶液、聚氧乙烯聚烯醚嵌段共聚物F108水溶液和聚乙烯醇PVA水溶液中至少一种；S3、将所述双乳液液滴固化成核壳微球后进行培养，利用所述微球中靶标结合元件与目标产物结合形成指示信号，以对所述微球进行微流控分选；所述靶标结合元件为与荧光团和猝灭剂对连接的适配体，荧光团和猝灭剂对是核酸染料和荧光杂交探针，所述目标产物脱落酸的适配体的核苷酸序列如SEQIDNO：1所示。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 南京师范大学 基于双乳液体系的高通量筛选微生物菌株的方法及其应用
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