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申请/专利权人：兰特门内阿斯-法克托尔公司

摘要：本发明涉及称为抗分泌因子AF17的新的肽，所述肽是分离重组的和或合成产生的，具有至少1.8小时的t12。所述肽例如可用于使动物和人的病理性流体运输和或炎症反应正常化。AF‑17和AF‑17的药物组合物可以例如用于治疗和或预防TBI和或与TBI相关的继发性脑损伤、以及用于治疗和或预防获得性脑损伤和用于优化癌症治疗。

主权项：1.一种合成产生的肽、或其具有等同功能活性的药学活性盐，其中，所述肽如SEQ.ID.NO:7所示，所述SEQ.ID.NO:7的氨基酸2号位具有半胱氨酸二硫化物，所述肽具有抗分泌活性。

全文数据：抗分泌因子17技术领域抗分泌因子AF是抑制炎症并调节流体运输的蛋白质复合物；AF复合物存在于经修饰的蛋白酶体中。先前已经表征了包含位于抗分泌因子AF蛋白质序列的氨基酸35号位和50号位之间的抗腹泻序列AF-16的合成肽WO9708202；WO05030246。已知AF16在血浆中快速降解。本发明公开了AF-16在血浆中的主要代谢归宿fate，该主要代谢归宿是AF16的快速二硫键形成，产生在氨基酸2号位C2上包含半胱氨酸二硫键的AF-16下文称为AF-17。这种可逆的作用明显保护AF16免受快速肽酶降解。基于该出人意料的见解，本发明首次公开了包含AF-17的合成肽，当施用给有此需要的患者时，该合成肽提供显著延长的AF16的半衰期。背景技术抗分泌因子AF抗分泌因子AF是一种41kDa蛋白质，最初被描述为提供针对腹泻疾病和肠道炎症的保护综述见：Theantisecretoryfactor：synthesis,anatomicalandcellulardistribution，andbiologicalactioninexperimentalandclinicalstudies.IntRevCytol，2001.210：39-75页。将抗分泌因子AF蛋白进行测序并克隆其cDNA。抗分泌活性似乎主要由位于抗分泌因子AF蛋白质序列即，抗腹泻序列共有序列上的氨基酸35号位和50号位之间的肽来发挥，该蛋白质序列包含抗腹泻序列的至少4个至16个氨基酸、例如特别是4个、6个、7个、8个或16个氨基酸。免疫化学研究和免疫组织化学研究已经表明，存在抗分泌因子AF蛋白，并且也可以由体内的大多数组织和器官合成。先前已经表征了包含抗腹泻序列共有序列或其片段的合成肽WO9708202；WO05030246。先前已经公开了抗分泌因子AF蛋白和肽使病理性流体运输和或炎症反应正常化，例如在用霍乱毒素攻击后的肠和中枢神经系统的脉络丛中WO9708202。因此，例如在WO9708202中，已经提出具有诱导内源性合成AF或摄入添加的AF的能力的食物和饲料可用于治疗水肿、腹泻、脱水和炎症。WO9821978公开了具有酶活性的产品用于生产诱导抗分泌因子AF蛋白形成的食物的用途。WO00038535进一步公开了本身富含天然抗分泌因子AF蛋白NASP的食品。抗分泌因子AF蛋白及其片段还显示出在治疗与损失或获得细胞相关的病症中改善神经组织的修复，以及干细胞和祖细胞及其衍生细胞的增殖、凋亡、分化和或迁移WO05030246，并且在治疗和或预防眼内高压中同样有效WO07126364，对于治疗和或预防筋膜间隙综合征也同样有效WO07126363。本发明人已经进一步显示AF能够监控和或有益地影响膜中脂筏、受体和或细胞膜穴样内陷的结构、分布和多种功能，因此可用于治疗和或预防结构解体和细胞膜中脂筏和或细胞膜穴样内陷的功能障碍WO07126365。本发明人已经进一步能够证明相同的抗分泌因子AF蛋白及其肽和片段可以干预跨膜蛋白质的生物活化，例如，NKCC1至FAK和CAP，证明它因此可以直接调节病理细胞和或扰动细胞中离子通道的病理活性，有效地使所述细胞中的细胞内压力和跨膜蛋白功能正常化，从而允许改善用于例如癌症治疗的药物的摄取WO2010093324。本发明人从血液中分离出名为AF1抗分泌因子1的蛋白质，并对其编码基因测序。后来，AF1显示是19S蛋白酶体亚单元的组分，命名为PSMD4、RPN10或S5a。进一步显示，细菌肠毒素和加工谷物能够诱导改变形式的抗分泌因子AF，该改变形式的抗分泌因子抑制肠道中的炎症和流体分泌。发现这种改变形式的AF与多糖琼脂糖结合。用α-甲基葡糖苷洗脱后，可以通过ELISA测定其浓度。出人意料地，最近证明蛋白酶体在摄入加工谷物SPC后与补体因子C3反应。该反应导致先前隐藏的抗分泌表位的暴露，并且蛋白酶体补体复合物形成导致C3分裂成其无活性形式C3c。因此，有许多医疗条件将受益于AF-16的施用。不幸的是，已经显示了一旦施用，它在患者体内的半衰期非常短。本发明首次提出了分离的、重组的或合成产生的受保护的AF16代谢物本文称为AF-17，一旦施用，它在患者体内的半衰期显著延长。发明内容在一个实施方式中，本发明涉及分离重组的和或合成产生的肽下文称为AF-17如SEQ.ID.NO.7所示、或其具有等同功能活性的药学活性盐，所述肽包含如SEQ.ID.NO.3所示的氨基酸序列AF-16和SEQ.ID.NO.3的氨基酸2号位的半胱氨酸二硫键，所述肽具有抗分泌活性。AF16在不同物种中的相对稳定性如图12所示。本文首次记载了，无论物种如何，AF16迅速消失，体外半衰期t12小于或等于10分钟。此外，本发明人首次能够确定肽AF-16施用后的分子归宿，导致彻底理解AF的任何药理作用的药代动力学基础以及具有提高的体外半衰期t12的新的AF-肽AF-17的开发，能够得到在施用给有此需要的患者后监控活性AF物质归宿的改进方法，因此导致用于优化活性AF和或AF肽的剂量方案的改进方法。本发明首次将AF的主要代谢物鉴定为AF16的半胱氨酸二硫化物AF-17。可逆的AF16的快速二硫化物形成明显保护AF16免于快速肽酶降解，并且是一种使AF16能够更高程度地完整地到达其靶标的保护功能，和或改善了在施用给有此需要的患者后监控活性AF物质归宿的方法，因此导致活性AF和或AF肽的优化剂量方案。如本文所揭示的，本发明人首次合成并研究了AF-17的体外药代动力学特性，证明AF-17可以直接施用给有此需要的患者，并且AF-17至少与AF-16一样有效用于在用霍乱毒素攻击后例如在肠中使病理性流体运输和或炎症反应正常化，如试验3所示。鉴于AF-16先前已经被证明在多种不同的疾病和病症中有效，所述疾病和病症选自但不限于使病理性流体运输和或炎症反应正常化，治疗和或预防TBI、肿瘤和或肿瘤相关的并发症，用于治疗癌症、间室综合征、胶质母细胞瘤、糖尿病和腹泻，用于优化给定药物例如小分子药物的细胞摄取，用于神经保护，以及用于使calveola正常化，并且AF-17是AF-16天然存在的的代谢物，可以假设本文公开的AF-17在用于治疗与已知AF-16有效的相同疾病和或病症上至少与AF-16一样有效。因此，本发明公开了一种新的和改进的分离重组的或合成的活性肽及其医疗用途，所述活性肽由抗分泌因子AF蛋白AF-17构成、包含抗分泌因子AF蛋白AF-17、衍生自抗分泌因子AF蛋白AF-17、和或基于抗分泌因子AF蛋白AF-17。特别地，本发明涉及本文描述的AF-17用于治疗创伤性脑损伤TBI的用途。此外，正如多年来对于抗分泌蛋白AF的广泛研究所熟知的，内源性蛋白在转录后加工成大量的较小的肽，只要蛋白质的核心活性序列AF-6，如SEQ.ID.NO.2所示是完整的，均具有证实的类似的抗分泌效果。因此有理由认为，在自然环境中，抗分泌蛋白AF将被降解和或转录后地加工成包含AF-6的较小的肽，并且那些较小的肽的代谢物将类似于观察到的AF-16的归宿，也至少受到AF-6的唯一半胱氨酸中的二硫键即AF-6的氨基酸1号位，如SEQ.ID.NO.2所示的保护。因此，本发明还涉及分离重组的和或合成产生的肽、或其具有等同功能活性的药学活性盐，所述肽对应于如SEQ.ID.NO.1所示的抗分泌因子AF蛋白的片段AF和或具有等同活性的其同源物，其中，所述肽至少包含如SEQ.ID.NO.2所示的氨基酸序列AF-6和SEQ.ID.NO.2的氨基酸1号位的半胱氨酸二硫键，与由SEQ.ID.NO.1所示的抗分泌因子AF蛋白的相同片段构成的肽和或其同源物其中，所述肽不包含SEQ.ID.NO.2的氨基酸1号位的半胱氨酸二硫键相比，所述肽具有抗分泌活性和提高的体外半衰期t12。在本优选的实施方式中，本发明的分离重组的和或合成产生的肽包含SEQ.ID.NO.3所示的氨基酸序列AF-16和SEQ.ID.NO.3的氨基酸2号位的半胱氨酸二硫键。根据本发明的分离重组的和或合成产生的肽是6个至25个氨基酸长，优选7个至17个、6个至16个、7个至20个、7个至17个、16个至25个、16个至20个、17个至20个、17个至25个氨基酸长，例如6个、7个、8个、9个、16个或17个氨基酸长。在某些实施方式中，它是至少6个、至少7个、至少16个或至少17个氨基酸长和或至多7个、至多8个、至多9个、至多10个、至多11个、至多12个、至多13个、至多14个、至多15个、至多16个、至多17个、至多18个、至多19个、至多20个、至多21个、至多22个、至多23个、至多24个或至多25个氨基酸长。根据本发明的分离重组的和或合成产生的肽通常包含如SEQ.ID.NO.7所示的氨基酸序列VCCHSKTRSNPENNVGL、或如SEQ.ID.NO.8所示的氨基酸序列CCHSKTR、或如SEQ.ID.NO.9所示的氨基酸序列VCCHSKTR。根据本发明的分离重组的和或合成产生的肽通常由如SEQ.ID.NO.7所示的氨基酸VCCHSKTRSNPENNVGL、或如SEQ.ID.NO.8所示的氨基酸序列CCHSKTR、或如SEQ.ID.NO.9所示的氨基酸序列VCCHSKTR构成。根据本发明的分离重组的和或合成产生的肽通常具有至少0.2小时的t12，优选至少0.25小时、至少0.3小时、至少0.4小时、至少0.5小时、至少1小时、或至少1.5小时、至少1.9小时、至少2.0小时、至少2.5小时的t12，如至少1.8小时的t12。本发明进一步涉及根据本发明的分离重组的和或合成产生的肽用于医疗的用途，例如用于治疗和或预防选自由以下组成的列表中的疾病和病症：病理性流体运输、感染、炎症、炎症反应、TBI、TBI相关的病症、肿瘤、肿瘤相关的并发症、癌症、间室综合征、胶质母细胞瘤、糖尿病、和腹泻。本发明进一步涉及根据本发明的分离重组的和或合成产生的肽，用于优化活性物质的细胞摄取，用于神经保护和或用于使calveola正常化。在一个实施方式中，设想了包含根据本发明的分离重组的和或合成产生的肽和适当的药物载体的药物组合物和或化妆品组合物。根据本发明的药物组合物和或化妆品组合物旨在用于治疗和或预防选自由以下组成的列表中的疾病和病症：病理性流体运输、感染、炎症、炎症反应、TBI、TBI相关的病症、肿瘤、肿瘤相关的并发症、癌症、间室综合征、胶质母细胞瘤、糖尿病、和腹泻。本发明进一步涉及根据本发明的药物组合物和或化妆品组合物用于优化活性物质的细胞摄取、用于神经保护和或用于使calveola正常化。还涉及在有此需要的患者中使病理性流体运输和或炎症反应正常化的方法，和或优化活性物质的细胞摄取、用于神经保护和或用于使calveola正常化的方法和或用于治疗和或预防选自由以下组成的列表中的疾病和病症的方法：病理性流体运输、感染、炎症、炎症反应、TBI、TBI相关的病症、肿瘤、肿瘤相关的并发症、癌症、间室综合征、胶质母细胞瘤、糖尿病和腹泻，包括将有效量的根据本发明的分离重组的和或合成产生的肽或包含所述肽的药物组合物施用给有此需要的动物或人。本发明还涉及针对具有基本上SEQ.ID.NO.7、SEQ.ID.NO.8或SEQ.ID.NO.9所示的氨基酸序列的肽的抗体，以及涉及其用于检测生物体例如动物，包括哺乳动物和人中的所述蛋白质或其同源物或片段的用途。本文还提供了编码具有基本上SEQ.ID.NO.1至SEQ.ID.NO.9中任一个所示的氨基酸序列的肽的核酸用于产生相应肽的用途，其中，所述肽包含在SEQ.ID.NO.1的至少氨基酸aa36号位上的、SEQ.ID.NO.2的至少aa1号位上的、SEQ.ID.NO.3的至少aa2号位上的、和或SEQ.ID.NO.4的至少aa2号位上的至少一个半胱氨酸二硫键。附图说明图1半胱氨酸的氧化。A：次磺酸，B：亚磺酸，C：磺酸图2AF16的N-乙基马来酰亚胺类似物AF16-NEM图3AF16A和AF16-NEMB的人血浆和缓冲液稳定性图4LC-MS检测的人血浆中AF16降解产物图5在Caco-2细胞存在下AF16降解。+PI表示蛋白酶抑制剂混合物图6在Caco-2细胞存在下AF16降解的代谢物形成动力学。蓝色菱形AF16。红色正方形AF16+抑制剂混合物图7在Caco-2细胞存在下AF16降解的代谢物形成动力学。蓝色菱形AF16。红色正方形AF16+抑制剂混合物图8在Caco-2细胞存在下AF16降解的代谢物形成动力学。蓝色菱形AF16。红色正方形AF16+抑制剂混合物图9在Caco-2细胞存在下AF16降解。确定结构的建议途径图10AF16在10℃下20小时内不同沉淀方式的相对稳定性图10显示了在20小时内重复注射相同样品三次的结果。明显的是，随着时间变化，TCA和MeCN显示出良好的表观稳定性。在20小时时，注意到ZnSO4略微消失。用MeOH显示随时间变化的显著损失。在MeOH的作用下，AF16很可能是稳定的，但损失源于肽沉淀，因为已知肽在醇混合物中具有有限的溶解度。图11AF16在10℃下20小时内不同沉淀方式的相对稳定性图11显示了上文获得的数据在MS-强度离子计数方面彼此比较的图。TCA沉淀显示最强的信号，并设为参考。明显的是，非有机方法落后，很可能是由于共洗脱抑制离子。具有最佳稳定性的两种方法TCA和MeCN显示出超过500倍的灵敏性差异，因此对于继续研究，选择在整个研究中使用TCA。图12AF16在10℃下20小时内不同沉淀方式的相对稳定性图13AF16的动力学和人上和大鼠下血浆中鉴定的代谢物图14592.3594.4代谢物的增强分辨率扫描图15使用作为血浆沉淀剂的ZnSO4和+-DTT的AF16和鉴定的代谢物的动力学。A：人+DTT，B：人-DTT，C：大鼠+DTT和D：大鼠-DTT。AF16显示为整圆图16人血浆中主要鉴定产物的相对形成图17大鼠血浆中主要鉴定产物的相对形成图18序列表具体实施方式定义和缩写缩写IFP：组织间隙液压；PBS：磷酸盐缓冲盐水；AF：抗分泌因子，全长AF蛋白如SEQ.ID.NO.1所示AF-6：六肽CHSKTR如SEQ.ID.NO.2所示；AF-7：由氨基酸CCHSKTR组成的肽如SEQ.ID.NO.8所示；AF-16：由氨基酸VCHSKTRSNPENNVGL组成的肽如SEQ.ID.NO.3所示；AF-17：由氨基酸VCCHSKTRSNPENNVGL组成的肽如SEQ.ID.NO.7所示；AF-8：七肽CHSKTR如SEQ.ID.NO.4所示；AF-9：由氨基酸VCCHSKTR组成的肽如SEQ.ID.NO.9所示；八肽IVCHSKTR如SEQ.ID.NO.5所示；五肽IVCHSKTR如SEQ.ID.NO.6所示；SPC：特殊加工的谷物；RTT：用于测量大鼠小肠中标准化分泌反应的方法，如SE9000028-2公开号466331中公布的用于测量AFASP含量的方法；AF：抗分泌因子；ELISA：酶联免疫吸附试验PBS：磷酸盐缓冲盐水；AP：碱性磷酸酶；BSA：牛血清白蛋白；mAb：单克隆抗体；LC-MSMS：纳米流动液相色谱-串联质谱；PAGE：聚丙烯酰胺凝胶电泳。HSV1：单纯性疱疹病毒-1TBI：外伤性脑损伤定义蛋白质是由通过肽键连接在一起的由氨基酸残基构成的生物大分子。作为氨基酸的线性聚合物的蛋白质也称为多肽。通常，蛋白质具有50个至800个氨基酸残基，因此具有约6000至约数十万道尔顿或更高的分子量。小蛋白质称为肽、多肽或寡肽。术语“蛋白质”、“多肽”、“寡肽”和“肽”在本文中可互换使用。肽可以具有非常少的氨基酸残基，例如2个至50个氨基酸残基aa。术语“抗分泌的”在本文中是指抑制或减少分泌和或流体输送。在本文中，术语“抗分泌因子蛋白”、“抗分泌因子AF蛋白”、“AF-蛋白”、AF或其同源物、衍生物或片段可以与如WO9708202中定义的术语“抗分泌因子”或“抗分泌因子蛋白”互换使用，并且是指具有抗分泌和或等效功能和或类似活性的抗分泌因子AF蛋白或其肽或其同源物、衍生物和或片段，或是指不改变多肽功能的其修饰。因此，应理解，本上下文中的“抗分泌因子”、“抗分泌因子蛋白”、“抗分泌肽”、“抗分泌片段”或“抗分泌因子AF蛋白”也可以是指其衍生物、同源物或片段。这些术语在本发明的上下文中都可以互换使用。此外，在本上下文中，术语“抗分泌因子”可以缩写为“AF”。本发明上下文中的抗分泌因子AF蛋白也指具有抗分泌性质1的蛋白质，如先前在WO9708202和WO0038535中所定义的。还公开了抗分泌因子，例如在WO05030246中。是一种包含特殊加工谷物SPC的医疗食品。在本发明上下文中，“医疗食品”是指食品、饲料或食品补充剂、或用于特殊饮食的食品，其已经用抗分泌因子AF蛋白制备，或者替选地具有诱导内源性AF的合成和或活化的能力。所述食物可以是流体或固体形式例如液体或粉末的任何合适的食物、或任何其他合适的食料。这种物质的实例可以在WO0038535或WO9109536中找到。术语抗分泌因子也意指天然抗分泌因子NASP，其可以在具有高含量抗分泌因子NASP的蛋黄中提供，例如在SE900028-2和WO0038535中公开的，并在下文中进一步描述。具体实施方式本发明首次将AF的主要代谢物鉴定为AF16的半胱氨酸二硫化物AF-17。可逆的AF16的快速二硫化物形成明显保护AF16免于快速肽酶降解，并且是一种使AF16能够更高程度地完整到达其靶标的保护功能，并且改善了在施用给有此需要的患者后监控活性AF物质归宿的方法，因此导致活性AF物质、全长AF、AF片段和或AF肽的优化剂量方案。如本文首次记载的，公开了新的合成产生的或分离重组的具有提高的体外半衰期t12AF-肽AF-17，能够得到用于在施用给有此需要的患者后监控活性AF物质归宿的改进方法，因此产生用于优化活性AF和或AF肽的剂量方案的改进方法。在一个实施方式中，本发明涉及分离重组的和或合成产生的肽下文称为AF-17如SEQ.ID.NO.7所示、或其具有等同功能活性的药学活性盐，其包含如SEQ.ID.NO.3所示的氨基酸序列AF-16和SEQ.ID.NO.3的氨基酸2号位的半胱氨酸二硫键，所述肽具有抗分泌活性。在另一个实施方式中，本发明涉及分离重组的和或合成产生的肽下文称为AF-7如SEQ.ID.NO.8所示、或其具有等同功能活性的药学活性盐，其包含如SEQ.ID.NO.2所示的氨基酸序列AF-6和SEQ.ID.NO.3的氨基酸1号位的半胱氨酸二硫键，所述肽具有抗分泌活性。在另一个实施方式中，本发明涉及分离重组的和或合成产生的肽下文称为AF-9如SEQ.ID.NO.9所示、或其具有等同功能活性的药学活性盐，其包含如SEQ.ID.NO.4所示的氨基酸序列AF-8和SEQ.ID.NO.4的氨基酸2号位的半胱氨酸二硫键，所述肽具有抗分泌活性。如本文所揭示的，本发明人首次公开了根据本发明的肽，所述肽至少与AF-16一样有效用于在用霍乱毒素攻击后例如在肠中使病理性流体运输和或炎症反应正常化，如试验3所示。根据本发明的肽在多种不同疾病和病症中有效，所述疾病和病症选自但不限于使病理性流体运输和或炎症反应正常化，治疗和或预防TBI、肿瘤和或肿瘤相关的并发症，用于治疗癌症、间室综合征、胶质母细胞瘤、糖尿病和腹泻，用于优化给定药物的细胞摄取，用于神经保护，以及用于使calveola正常化。因此，本发明公开了一种新的和改进的分离重组的或合成的活性肽及其医疗用途，该活性肽由抗分泌因子AF蛋白AF-17构成、包含抗分泌因子AF蛋白AF-17、衍生自抗分泌因子AF蛋白AF-17、和或基于抗分泌因子AF蛋白AF-17。特别地，本发明涉及本文描述的AF-17、AF-7和或AF-9中的一种或组合用于治疗和或预防选自由以下组成的列表中的疾病和病症的用途：病理性流体运输、感染、炎症、炎症反应、TBI、TBI相关的病症、肿瘤、肿瘤相关的并发症、癌症、间室综合征、胶质母细胞瘤、糖尿病、和腹泻，或用于优化活性物质的细胞摄取，用于神经保护和或用于使calveola正常化的用途。本发明公开了一种新的和改进的分离重组的或合成的活性肽，该活性肽由抗分泌因子AF蛋白AF-17、特别是称为抗分泌因子AF17的新肽构成，包含抗分泌因子AF蛋白AF-17、特别是称为抗分泌因子AF17的新肽，衍生自抗分泌因子AF蛋白AF-17、特别是称为抗分泌因子AF17的新肽，和或基于抗分泌因子AF蛋白AF-17、特别是称为抗分泌因子AF17的新肽。该肽例如用于使动物包括人的病理性流体运输和或炎症反应正常化。AF-17可以进一步用于免疫检测，作为用于培育动物的饲料添加剂和用作涉及对抗水肿、脱水和或炎症的疾病的止泻剂和药物。抗分泌因子抗分泌因子是一类天然存在于体内的蛋白质。人抗分泌因子AF蛋白是41kDa蛋白，当从脑垂体分离时包含382个至288个氨基酸。根据本发明的活性位点可以定位于靠近蛋白质N末端的区域中的蛋白质，特别是定位于SEQIDNO1的氨基酸1至163，更具体地定位于抗分泌因子AF蛋白质序列的氨基酸第35至50位。AF的生物学效应由包含如SEQ.ID.NO.2所示的AF-6所述共有序列的至少6个氨基酸的任何肽或多肽发挥，或由包含不改变多肽和或肽的生物学功能的其修饰的任何肽或多肽发挥。本发明人已经表明，抗分泌因子在某种程度上与构成所有细胞中主要成分的亚单元的蛋白质S5a和Rpn10、26S蛋白酶体更具体地在19SPA700帽同源。在本发明中，抗分泌因子AF蛋白质被定义为具有相同功能特性的一类同源蛋白质。抗分泌因子也与血管抑制素高度相似，该血管抑制素是已知与血小板反应蛋白-1结合并与癌症进展相关的另一种蛋白同种型。根据本发明的抗分泌因子AF蛋白和或肽的同源物、衍生物和片段都具有类似的生物学活性。在本上下文中，同源物、衍生物和片段包含至少6个氨基酸如SEQ.ID.NO.2所示，其对应于天然存在的抗分泌因子AF蛋白，该蛋白可以通过改变一个或多个氨基酸进一步修饰以便优化抗分泌因子的生物活性，而不改变多肽和或肽的基本生物学功能。在本上下文中，衍生物意指与本文定义的抗分泌因子具有等同的活性和或功能等同活性的蛋白质，该蛋白质直接地或通过修饰或部分取代衍生自另一种物质，其中一种或多种氨基酸已经被另一种可以是修饰的或非天然的氨基酸取代。例如，根据本发明的抗分泌因子衍生物可以包含N末端保护基团和或C末端保护基团。N末端保护基团的一个实例包括乙酰基。C末端保护基团的一个实例包括氨基。此外，至少70％，例如至少72％、至少75％、至少77％、至少80％、至少82％、至少85％、至少87％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、或至少99％与根据本发明的抗分泌因子AF蛋白质、肽、同源物、衍生物和或片段的氨基酸序列相同的任何氨基酸序列也认为在本发明的范围内。具有与参考氨基酸序列至少例如95％相同的氨基酸序列的蛋白质、其同源物、衍生物、肽和或片段意指例如除了氨基酸序列可以在参考氨基酸序列的每100个氨基酸中包括最多5个点突变之外、具有与参考序列相同的氨基酸序列的肽。换句话说，为了获得具有与参考氨基酸序列至少95％相同的氨基酸序列的多肽，参考序列中至多5％的氨基酸可以缺失或被另外的氨基酸取代，或者可以将参考序列中至多5％的总氨基酸的多个氨基酸插入参考序列中。参考序列的这些突变可以发生在参考氨基酸序列的氨基末端位置或羧基末端位置或这些末端位置之间的任何位置，分别散布在参考序列的氨基酸之间或参考序列内的一个或多个连续基团中。在本发明中，局部算法程序最适合于确定一致性。局部算法程序例如SmithWaterman将一个序列中的子序列与第二个序列中的子序列进行比较，并找到子序列的组合和那些子序列的比对，这产生最高的总体相似性分数。如果允许，内部空位将被罚分。局部算法适合比较具有单个域、或者只是共同的结合位点两个多域蛋白。确定一致性和相似性的方法在公开可用的程序中编码。用于确定两个序列之间的一致性和相似性的优选计算机程序方法包括但不限于GCG程序包Devereux，J等人1994BLASTP、BLASTN和FASTAAltschul，S.F.等人1990。BLASTX程序从NCBI和其他来源BLASTManual，Altschul，S.F.等人，Altschul，S.F.等人1990可公开获得。每个序列分析程序都有默认的评分矩阵和默认的空位罚分。通常，期望分子生物学家使用由所使用的软件程序建立的默认设置。具有如本文所定义的等同活性的抗分泌因子AF蛋白或其肽或同源物、衍生物和或片段可以包含6个氨基酸或更多，例如6个至16个氨基酸，例如6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、16个、17个、18个、19个、或20个氨基酸或更多。在其他优选的实施方式中，抗分泌因子由7个、9个或17个氨基酸构成。在某些实施方式中，根据本发明的抗分泌因子AF蛋白、其同源物、衍生物、肽和或片段由6个、7个、8个、9个、15个、16个、或17个氨基酸构成。在本优选的实施方式中，分离重组的和或合成的肽AF-17如SEQ.ID.NO.7所示、或其具有等同功能活性的药学活性盐，包含如SEQ.ID.NO.3所示的氨基酸序列AF-16和SEQ.ID.NO.3的氨基酸2号位的半胱氨酸二硫键，所述肽具有抗分泌活性。在另一个优选的实施方式中，分离重组的和或合成的肽、或其具有等同功能活性的药学活性盐，至少包含如SEQ.ID.NO.2所示的氨基酸序列AF-6和SEQ.ID.NO.2的氨基酸1号位的半胱氨酸二硫键，所述肽具有抗分泌活性。在另一个优选的实施方式中，分离重组的和或合成的肽、或其具有等同功能活性的药学活性盐，至少包含如SEQ.ID.NO.4所示的氨基酸序列AF-8和SEQ.ID.NO.4的氨基酸2号位的半胱氨酸二硫键，所述肽具有抗分泌活性。根据本发明的抗分泌因子AF蛋白、其同源物、衍生物、肽和或片段可以在体内或体外产生，例如重组地、合成地和或化学地合成、和或从天然存在的抗分泌因子来源例如从猪垂体腺或鸟蛋中分离。在生产之后，根据本发明的抗分泌因子AF蛋白质、其同源物、衍生物、肽和或片段可以进一步加工，例如通过化学或酶促切割成较小的抗分泌活性片段和或通过修饰氨基酸和或通过在SEQ.ID.NO.2的氨基酸1号位、替选地在SEQ.ID.NO.3的氨基酸3号位上通过肽中半胱氨酸中的二硫键添加半胱氨酸。目前不可能通过纯化获得纯形式的抗分泌因子AF蛋白。然而，如先前在WO9708202和WO05030246中所公开的，可以重组地或合成地产生生物活性的抗分泌因子蛋白。WO9708202还公开了具有7个至80个氨基酸的该蛋白质的的生物活性片段的制备。在本上下文中，根据本发明的抗分泌因子AF蛋白、其同源物、衍生物、肽和或片段是哺乳动物人除外中产生的抗分泌因子AF蛋白的天然代谢产物、或重组产生的和任选地化学修饰的肽、或合成产生的肽。根据本发明的抗分泌因子AF蛋白质、其同源物、衍生物、肽和或片段可以进一步包含N末端保护基团和或C末端保护基团。N末端保护基团的一个实例包括乙酰基。C末端保护基团的一个实例包括氨基。在本发明的优选实施方式中，根据本发明的抗分泌因子AF蛋白、其同源物、衍生物、肽和或片段选自SEQ.ID.NO.7至SEQ.ID.NO.9，使用用于氨基酸的常见单字母缩写，即VCCHSKTRSNPENNVGLSEQ.ID.NO.7，在本上下文中也称为AF-17、CCHSKTRSEQ.ID.NO.8，在本上下文中也称为AF-7、VCCHSKTRSEQ.ID.NO.9，在本上下文中也称为AF-9。如所附序列表中指明的，以上指明的序列中的一些氨基酸可以被其他氨基酸替换。本发明还涉及根据SEQ.ID.NO.7至SEQ.ID.NO.9的任何肽中的两种或更多种的组合。在另一个实施方式中，本发明涉及如本文公开的药物组合物的用途，该药物组合物包含两种或更多种根据本发明的抗分泌因子AF蛋白、其同源物、衍生物、肽和或片段。二硫键在本上下文中，二硫键是指具有通式结构R-S-S-R的官能团。该连接也称为SS键或双硫键，通常通过两个硫醇基团的偶联衍生。在形式上，与其同类物过氧化物R-O-O-R类似，该连接是过硫化物。半胱氨酸缩写为Cys或C是具有式HO2CCHNH2CH2SH的半必需蛋白原氨基酸。它由密码子UGU和UGC编码。Cys中的硫醇侧链经常作为亲核试剂参与酶促反应。硫醇易于氧化而得到二硫化物衍生物半胱氨酸，其在许多蛋白质中起重要的结构作用。半胱氨酸残基是化学上涉及最多的氨基酸之一，通常参与氧化还原化学反应，但也作为抗活性亲电子试剂例如活性氧物质或代谢修饰的异生素药物的亲核试剂。AF16在SEQ.ID.NO.2的2号位包含一个半胱氨酸残基。AF-17或者根据本申请的任何其他包含二硫化物的肽，例如但不限于AF-7和AF-9，因此被保护免受硫的氧化与其他半胱氨酸反应二硫键形成，与亲电试剂反应，因此对蛋白水解活性更具弹性。合成二硫键通常由巯基-SH基团的氧化形成。各种氧化剂促进这种包括空气和过氧化氢的反应。认为这种反应通过次磺酸中间体进行。在实验室中，在碱存在下的碘通常用于将硫醇氧化成二硫化物。替选地，蛋白质中的二硫键通常通过硫醇-二硫化物交换形成。在某些情况下，这些反应由酶介导，而在其他情况下，这些反应处于平衡控制下、尤其是在催化量的碱存在下。已经开发了许多用于形成二硫键的专门方法，用于有机合成中的应用，并且可以用于生产根据本发明的基于合成AF-17的或基于合成AF-7的或基于合成AF-9的或基于合成AF-7的AF-二硫键肽。如图3A所示，AF16显示出对血浆的高度灵敏性。降解动力学表明体外半衰期t12为0.4小时。预计AF-17具有几乎高5倍的稳定性，t12＝1.8小时。AF16对体循环中的酶促降解和化学降解是高度敏感的。随着半胱氨酸部分被修饰，AF-17对酶促反应或化学反应更具弹性。在Caco-2细胞渗透性试验期间AF16的定量试点试验清楚地显示肽的快速消失未示出。众所周知，在肠中，并且在Caco-2细胞的顶侧，存在刷状缘肽酶。AF16的降解动力学非常迅速，如所描述的，t12为8分钟。如试验1中所述，将AF16和相似量的同位素标记的肽在大鼠血浆和人血浆中温育。为了分析全扫描MS数据，使用来自Sciex、Lightsight的代谢物鉴定软件，其将温育的MS应答与质量控制QC样品进行比较，并将明显的峰指定为具有特定质量电荷mz值的代谢物。最大的代谢物峰面积按序排序，在某些情况下通过MSMS碎片验证。Skyline方法用于预测所鉴定的肽的片段，而且也有助于创建敏感的MRM方法，从而可以监控低的量。表6列出了在30分钟温育时鉴定的产物及其相对量。MS灵敏性可能不同，因此个别百分比可能变化。在查阅结果后，明显的是，基于所鉴定的峰的相对面积，一种代谢物比另一种代谢物大得多，在表6中指定为M1。然而，鉴定的质量对mz625630不对应于任何分解代谢产物预期的蛋白水解肽键切割。该对现在被鉴定为AF-16的半胱氨酸二硫化物AF-17。医疗TBI创伤性脑损伤TBI是复杂的损伤，具有广泛的症状和残疾。创伤性脑损伤TBI也称为颅内损伤，它发生在外力创伤性损伤大脑时。TBI可以基于严重程度、机制闭合或穿透性头部损伤或其他特征例如，发生在特定位置或广泛区域来分类。在本上下文中，TBI还意味着包括头部损伤，即它可以涉及对除了脑部以外的结构的损伤，例如头皮和颅。TBI是全世界死亡和残疾的主要原因，特别是在儿童和年轻人中。原因包括坠落、车祸和暴力。由于头部上局部撞击、头盖内的突然加速减速或者运动和突然撞击的复杂组合可以发生脑外伤。除了在受伤时侯造成的损伤之外，脑外伤导致继发性损伤，在受伤后的几分钟和几天内发生的各种事件。这些过程包括脑血流量的改变和颅骨内的压力，这些过程对初始损伤的伤害有很大贡献。TBI可以引起许多身体、认知、社交、情感和行为影响，结果可以从完全康复到永久性残疾或死亡。在本上下文中，以下术语和定义涉及与TBI相关的不同损伤，所有这些损伤均通过向有此需要的患者闭合性脑损伤、开放性脑损伤、弥漫性轴索损伤、挫伤、穿透性创伤和继发性损伤施用分离重组的和或合成产生的肽或其具有等同功能活性的药学活性盐是可治疗的，所述肽对应于如SEQ.ID.NO.1所示的抗分泌因子AF蛋白的片段AF和或具有等同活性的其同源物，其中，所述肽至少包含如SEQ.ID.NO.2所示的氨基酸序列AF-6和SEQ.ID.NO.2的氨基酸1号位的半胱氨酸二硫键，例如如SEQ.ID.NO.3所示的氨基酸序列AF-16和SEQ.ID.NO.3的氨基酸2号位的半胱氨酸二硫键。本公开的分离重组的和或合成产生的肽、或其具有等同功能活性的药学活性盐，所述肽对应于如SEQ.ID.NO.1所示的抗分泌因子AF蛋白的片段AF和或具有等同活性的其同源物，其中，所述肽至少包含如SEQ.ID.NO.2所示的氨基酸序列AF-6和SEQ.ID.NO.2的氨基酸1号位的半胱氨酸二硫键，例如如SEQ.ID.NO.3所示的氨基酸序列AF-16和SEQ.ID.NO.3的氨基酸2号位的半胱氨酸二硫键，特别适用于治疗和或预防继发性TBI，例如促进炎症和细胞损伤或死亡的化学物质的溶胀和释放。这导致大脑肿胀，这会增加颅内压并阻止脑脊液从颅骨排出。这导致压力和脑损伤进一步增加。如果不控制或阻止这种情况，脑可以脱出推过颅底，引起呼吸衰竭和死亡。预防这种继发性损伤是伤后急性医疗护理的重点。因此，本发明在目前优选的实施方式中涉及根据本发明的分离重组的和或合成产生的肽在制备用于治疗和或预防继发性TBI损伤的药物组合物中的用途。本发明同样涉及根据本发明的分离重组的和或合成产生的肽用于治疗和或预防继发性TBI损伤的用途，涉及根据本发明的分离重组的和或合成产生的肽用于治疗和或预防继发性TBI损伤的方法，以及通过给有此需要的患者施用足以治疗和或治愈所述患者和或预防TBI损伤的症状的量的根据本发明的分离重组的和或合成产生的肽以治疗和或预防继发性TBI损伤的方法。继发性TBI损伤包括：·颅内出血在颅内流血·脑肿胀·颅内压在颅内的压力增高·与缺氧有关的脑损伤·颅内感染，常见于穿透性创伤·导致细胞死亡的化学变化·颅内液体增多脑积水获得性脑损伤。获得性脑损伤是除了先天性损伤、出生创伤、遗传性损伤或退行性损伤以外的其他损伤。这包括创伤性脑损伤。在非创伤性型的获得性脑损伤中，脑通常弥漫性受伤。这些损伤通常不包括在创伤性脑损伤中，但症状的范围相同。常见原因是缺氧和低氧。这些是脑缺氧和脑氧气不足。由于呼吸的机械问题，它们可以同时出现心脏骤停或出血。药物和中毒也会导致获得性创伤性脑损伤。一氧化碳中毒是可以导致脑损伤的中毒的实例。本公开的分离重组的和或合成产生的肽或其具有等同功能活性的药学活性盐，所述肽对应于如SEQ.ID.NO.1所示的抗分泌因子AF蛋白的片段AF和或具有等同活性的其同源物，其中，所述肽至少包含如SEQ.ID.NO.2所示的氨基酸序列AF-6和SEQ.ID.NO.2的氨基酸1号位的半胱氨酸二硫键，例如如SEQ.ID.NO.3所示的氨基酸序列AF-16和SEQ.ID.NO.3的氨基酸2号位的半胱氨酸二硫键，对于治疗和或预防获得性脑损伤同样有用。因此，本发明在目前优选的实施方式中涉及根据本发明的分离重组的和或合成产生的肽在制备用于治疗和或预防获得性脑损伤的药物组合物中的用途。本发明同样涉及根据本发明的分离重组的和或合成产生的肽用于治疗和或预防获得性脑损伤的用途，涉及根据本发明的分离重组的和或合成产生的肽用于治疗和或预防获得性脑损伤的方法，以及通过给有此需要的患者施用足够量的根据本发明的分离重组的和或合成产生的肽以治疗和或预防获得性脑损伤的方法。癌症在一个实施方式中，本发明涉及用于治疗癌症的方法，所述癌症例如但不限于胶质母细胞瘤，其特征在于，向有此需要的患者施用分离重组的和或合成产生的肽、或其具有等同功能活性的药学活性盐，所述肽对应于如SEQ.ID.NO.1所示的抗分泌因子AF蛋白的片段AF和或具有等同活性的其同源物，其中，所述肽至少包含如SEQ.ID.NO.2所示的氨基酸序列AF-6和SEQ.ID.NO.2的氨基酸1号位的半胱氨酸二硫键，例如如SEQ.ID.NO.3所示的氨基酸序列AF-16和SEQ.ID.NO.3的氨基酸2号位的半胱氨酸二硫键。在本发明的一个实施方式中的所述方法可以用于促进优化的药物摄取和另外的药物物质的递送。用于治疗患有癌症例如但不限于胶质母细胞瘤的哺乳动物的所述方法在目前优选的实施方式中可以包括向所述患者喂食食物、食料和或食物补充剂，从而诱导AF的内源性产生以促进优化的药物摄取和另外的药物物质的递送。所述药物和或制剂在本上下文中选自由以下组成的组：抗癌药、抗肿瘤药、放射疗法、免疫物质和或细胞和抗生素物质、靶向创伤后损伤的药物、靶向神经退行性变的药物、以及抗炎症病症的药物。所述其他药物物质可以是纳米颗粒和或其制剂的形式，用于治疗癌症例如但不限于胶质母细胞瘤GBM肿瘤。在下文中，将详细描述本发明的实施方式。注意，以下单独公开的实施方式是分离的肽或合成的肽的实例和肽的预期用途。本发明不限于这些实例。间室综合征此外，在一个实施方式中，本发明涉及根据本发明的分离重组的和或合成产生的肽在制备用于治疗和或预防间室综合征的药物组合物中的用途。本发明同样涉及根据本发明的分离重组的和或合成产生的肽用于治疗和或预防间室综合征的用途，涉及根据本发明的分离重组的和或合成产生的肽用于治疗和或预防间室综合征的方法，以及通过给有此需要的患者施用足够量的根据本发明的分离重组的和或合成产生的肽以治疗和或预防获得性脑损伤的方法。在一个实施方式中，本发明涉及用于治疗和或预防间室综合征或其症状的方法，其特征在于，向有此需要的患者施用分离重组的和或合成产生的肽、或其具有等同功能活性的药学活性盐，所述肽对应于如SEQ.ID.NO.1所示的抗分泌因子AF蛋白的片段AF和或具有等同活性的其同源物，其中，所述肽至少包含如SEQ.ID.NO.2所示的氨基酸序列AF-6和SEQ.ID.NO.2的氨基酸1号位的半胱氨酸二硫键，例如如SEQ.ID.NO.3所示的氨基酸序列AF-16和SEQ.ID.NO.3的氨基酸2号位的半胱氨酸二硫键。在本发明的一个实施方式中的所述方法可以用于促进优化的药物摄取和另外的药物物质的递送。试验部分实施例1抗分泌因子蛋白AF16的肽片段的效果在几个组的各种药理学设置中相当好地研究。大多数研究集中在蛋白质或肽的药理学生理学效果上。然而，有关AF16的药代动力学观点的报道很少。因此，各种基质中的所有测试都假定AF或可能是添加的其肽片段是引起该效果的分子种类。事实上，其他实验室的先前研究已经表明AF或AF16对例如人或啮齿动物血浆中的降解很敏感，但没有进行详细的研究。该试验总结了理解在人混合血浆中以及在通常用于AF16药理学研究的Caco-2细胞存在下AF16肽的体外药代动力学和分子归宿的努力。材料和方法材料AF16的固体材料和稳定的同位素标记SIL的AF16IS由的JanBruhn提供。根据Sahlgrenska医院的EwaJohansson提供的信息，肽的纯度约为70％，其他成分是4x三氟乙酸TFA和未知的xH2O。然而，为了简化，关于肽的所有浓度均认为是100％。该假设不影响本文呈现的结果，因为它们是相对的。所有其他化学品和消耗品均来自共同的商业来源。AF16的烷基化和氧化为了测试AF16的氧化，使用50％过氧化氢H2O2溶液。向1ml的15μMAF16的0.1M碳酸氢铵溶液中加入2μl的H2O2最终浓度35mM。混合后立即将溶液注入直接输注质谱仪MS以寻找氧化产物。仅检测到氧化终产物磺酸，其中产生了灵敏的多重反应方法MRM表1。在同时的试验中，添加过量的二硫苏糖醇DTT，显示DTT防止氧化。通过在HPLC玻璃小瓶中将10μl的0.1MNEM与250μl的2mgmlAF16的PBS混合产生约1mM溶液来制备AF16的N-乙基马来酰亚胺NEM烷基化变体AF16-NEM。在MS分析之前，将样品静置、密封、在环境温度下保持30分钟。在30分钟后，剩余少于5％的AF16，并产生AF16-NEM的灵敏MRM方法表1。AF16在人血浆和Caco-2细胞中的稳定性使用合并的人血浆4个供体，2个雌性+2个雄性在HPLC玻璃小瓶中于37℃进行血浆中AF16和AF16-NEM稳定性的测试温育浓度20μM。测试了四种不同的基质：血浆：等渗的67mM磷酸钾pH7.4KP1:1，血浆：KP+0.1mMDTT，KP，和KP+0.1mMDTT。温育时间为0、1.5小时和3小时。在指定的时间，提取50μl等分试样并在150μl冰冷的甲醇中淬灭沉淀并冷冻直至分析。使用UPLC-MSMS进行相对定量。在Caco-2细胞存在下分三次进行AF16归宿的研究。首先，使用MRM方法表1在0、15、30和60分钟进行定量测量。在此，在顶端隔室和基底外侧隔室中监控AF16或其可能的磺酸代谢物未示出。第二个试验是在60分钟温育期间定性测定AF16的归宿。将HBSS缓冲液中的50μM的AF16在Caco-2细胞单层的顶侧温育，并在5、10、20、30和60分钟提取100μl等分试样。将样品置于含有100μl的MeCNH2O的96孔板上。将板密封并冷冻直至全扫描UPLC-MS分析参见下表和表2。第三个试验是第二个试验的镜像，唯一的区别是使用AF16：AF16IS1:1的HBSS溶液，以帮助结构解析。分析过程通过UPLC-MSMS分析来自不同测定的所有样品。使用以下系统：与WatersAcquityUPLCWatersCorp.偶联的WatersXEVOTQ三重四极质谱仪电喷雾离子化，ESI。对于色谱分离，在C18BEH1.7μm柱2x100mmWatersCorp.上使用一般梯度1％流动相B在3分钟全运行内达到50％。流动相A由0.05％的TFA组成和流动相B由100％的乙腈组成。流速为0.5毫升分钟。注入5μL样品并使用表1中报告的质谱设置进行运行。在全扫描MS分析中，使用相同的色谱设置，除了注入10μl满环。设定MS使用表1中的锥电压扫描100-400或400-700mz窗口中的离子。对于表2中所选母离子的子扫描分析，碰撞能量在10、20和40V之间步进。母离子、建议电荷和AF16的保留时间以及发现的代谢物列于表2中。表1.用于检测的MRMMS特定设置。用于定量分析的粗体的产物离子。化合物ESI+-mz母mz产品锥电压V碰撞能量VAF16+586.0784.2734.7490.226162018AF16IS+590.6791.2741.6494.726162018AF16磺酸+601.9758.5808.1836.720181414AF16NEM+627.7797.2846.8531.832202020表2.在用Caco-2细胞的AF16温育中发现的分子离子mz值和色谱保留时间。名称mzDa电荷xH保留时间分钟AF16586+3H2.14M1601+2H2.19M2645+1H2.21M3518+3H2.14M4402+1H2.25M5472+2H2.22M6626-2.13M7565+2H1.94M8418-1.93M9479-2.11结果AF16的烷基化和氧化半胱氨酸残基是化学上涉及最多的氨基酸之一，通常参与氧化还原化学反应，但也作为抗活性亲电子试剂例如活性氧物质或代谢修饰的异生素药物的亲核试剂。AF16含有一个半胱氨酸残基，因此测试在体外是否发生对氧化或其他修饰的敏感性非常重要。首先，用过氧化氢进行AF16的氧化，以便检查是否有可能建立可能的次磺酸衍生物、亚磺酸衍生物和磺酸衍生物的分析MS方法图1。过氧化氢被证明是过强的氧化剂而不允许检测低序物质，因此只能产生用于磺酸类似物的方法。为了进一步探索半胱氨酸在随后的试验中的作用，使用S-烷基化试剂N-乙基马来酰亚胺NEM产生烷基化变体图2。因此，NEM修饰的AF16被保护免受硫的氧化与其他半胱氨酸反应二硫键形成、与亲电试剂反应并且可能对蛋白水解活性更具弹性，是非天然氨基酸。AF16在人血浆中的稳定性。将AF16、稳定同位素标记的SILAF16和烷基化类似物AF16-NEM在以下中以1μM在37℃下温育3小时以研究稳定性：人血浆：0.1M的磷酸钾pH7.4KP1:1，人血浆：KP1:1+1mMDTT，KP，或KP+1mMDTT。包括KP以提供血浆的缓冲能力并且不将结果与pH相关效应混淆。结果如图3所示。如图3A所示，AF16显示出对血浆的高度灵敏性。降解动力学表明体外半衰期t12为0.4小时。包含DTT似乎具有保护作用，其将t12增加至1.1小时。有趣的是，非天然的AF16类似物图3B具有几乎高5倍的稳定性，t12＝1.8小时。这里，DTT还具有保护作用，t12＝4.2小时。这些结果表明AF16对体循环中的酶促降解和化学降解是高度敏感的。它还表明，如果半胱氨酸部分被修饰，AF16对酶促反应或化学反应更具弹性。DTT对两种化合物的作用更难以理解，但很可能这反映出DTT可以保护免受一般的氧化反应，例如形成羰基产物，例如均存在于AF16中的苏氨酸、赖氨酸、精氨酸和脯氨酸。AF16、SIL-AF16和AF16-NEM温育3小时的全扫描LC-MS分析显示了一些有趣的结果，见图4。发现两种不同的降解产物，在第5肽键赖氨酸和苏氨酸和第10键脯氨酸和谷氨酸的切割产生理论片段VCHSK-TRSNP、TRSNP-ENNVGL和ENNVGL。通过LC-MS检测片段TRSNP-ENNVGL和ENNVGL，但不检测VCHSK-TRSNP。据推测，未检测的片段在温育期间经历了进一步的降解。有趣的是，在与AF16-NEM温育时，在5号位没有发生明显的蛋白水解，表明排除了作用于N-末端的蛋白酶例如氨肽酶。用Caco-2细胞的AF16稳定性在Caco-2细胞渗透性试验期间AF16的定量试点试验清楚地显示肽的快速消失未示出。众所周知，在肠中，并且在Caco-2细胞的顶侧，存在刷状缘肽酶。为了进一步研究这一点，设计了单独的试验。在有或没有蛋白酶抑制剂混合物的情况下，将Caco-2细胞在顶侧暴露于50μM的AF16，并在1小时内取样。AF16降解的结果如图5所示。AF16的降解动力学非常迅速，如所描述的，t12是8分钟。抑制剂混合物显著减慢降解t12＝57分钟但不完全表明复杂的动力学。进行LC-MS分析以理解AF16的分子归宿。在有或没有抑制剂的温育中，与血浆稳定性试验相比，检测到几种新的代谢物。然而，这可以取决于所用的较高温育浓度。图6至图8显示代谢物M1至M9在试验时间内的形成动力学，图9显示这些产物的暂时确定的结构。表3分别显示30分钟和60分钟后各个分子种类、±抑制剂混合物的相关量。明显的主要代谢物10％用粗体显示。然而，重要的是，当进行如表3中的这种比较时，假设所有单个离子均具有相似的MS灵敏性。所有鉴定的产物都涉及在特定肽键的切割。建议的氨基酸组成如表4所示。在没有抑制剂混合物的情况下，温育30分钟后，三种明显的代谢物M1、M3和M6占优势。在温育60分钟后，M3和M6均下降，而M1继续线性增加图6AC和7C。观察图9中的建议途径，合理地假设M3的进一步N末端肽切割得到M1。在不知道M6的结构及其在20分钟后相对快速下降的情况下，这也可以表明M6有助于M1的形成。其他代谢物被认为是M1的进一步降解产物，但当然也可以通过较慢的途径以更直接的方式形成。表3.在与Caco-2细胞温育30或60分钟时各个分子种类的试验量％。+-肽酶抑制剂混合物抑制剂混合物由三种蛋白水解酶抑制剂贝他定氨肽酶、抑二肽素A二肽基肽酶IV和卡托普利血管紧张素转换酶、羧肽酶组成。有趣的是，由于这些酶的抑制，M1、M3和M6的形成被有效地最小化。此外，图4、图9和表4中所示的理论产物M7以相对线性的方式形成，并且似乎通过抑制剂稳定。这与N末端作用蛋白酶的抑制一致。图8A表明在没有抑制剂的情况下最初非常快速地形成M7，但可能有效地进一步代谢。虽然相对较小，但主要代谢物M8和M9尚未被鉴定。这两种代谢物很可能源于比上述肽键切割更复杂的化学过程。然而，为了试图理解未知代谢物M6、M8和M9的结构并验证已经在结构上指定的，使用SIL标记的AF16进行另外的试验。然而，从该试验中，不能从M6含有SIL氨基酸而M8和M9不含有SIL氨基酸的事实中获取更多信息。然而，这需要进一步探索。表4.试验性地鉴定的肽的建议氨基酸组成。在用Caco-2细胞温育60分钟后，还在基底侧监控AF16或任何检测到的代谢物的渗透性。然而，在该试验中没有发现除了M8之外的代谢物，M8在抑制的温育中产生明显的峰。结论和未来研究已经进行了许多重要的体外试验以进一步理解AF16的体外药代动力学。AF16最可能吸附到例如聚苯乙烯表面。然而，所描述的措施没有显示出效果，并且难以解释它有多严重。在较高浓度下1μM，效果不明显，因此在温育中，效果很可能很小。目前的研究已经表明，在人血浆和Caco-2细胞的存在下，AF16肽降解为几种肽产物。两种基质中的降解都非常快并且表明相似的代谢途径，产生作为主要的、线性形成的和表观稳定的产物M1在第5肽键赖氨酸和苏氨酸处的切割。通过抑制剂混合物的强效作用证明了刷状缘肽酶的参与，其将体外t12从8分钟增加至55分钟。在蛋白酶抑制剂的存在下，代谢模式的变化是令人感兴趣的，但在没有抑制剂的情况下，目前未知的代谢物M8、M9很可能不形成至显著的程度。用N-乙基马来酰亚胺保护2号位的半胱氨酸极大地稳定了人血浆中的肽。很可能是由于去除了氨肽酶的活性。综合考虑这些结果，有力地表明AF16的体外药代动力学是复杂的，需要仔细平衡并解释为在各种条件下观察到的药理作用。明显的是，AF16在与Caco-2细胞的短暂温育时间后在体外迅速消失。此外，一些代谢物以与AF16消失平行的速度非常快速地形成。AF16和代谢物很可能以相似的效率对相同靶标起作用，这将在功能测定中得到证实。实施例2AF16：血浆体外稳定性和代谢归宿介绍该试验总结了关于种间人、小鼠、大鼠和狗血浆动力学和AF16在人血浆和大鼠血浆中的定性分解代谢新陈代谢的最新发现。材料和方法材料AF16的固体材料和稳定的同位素标记SIL的AF16IS由AB、根据Sahlgrenska医院的EwaJohansson提供的信息，肽的纯度约为70％，其他成分是4x三氟乙酸TFA和未知的xH2O。然而，为了简化，关于肽的所有浓度均认为是100％。该假设不影响本文呈现的结果，因为它们是在相对基础上进行比较的。从教学医院获得人合并的血浆4名捐献者，2名男性和2名女性，非吸烟者。动物血浆来自NovakemiAB。所有其他化学品和消耗品均来自共同的商业来源。血浆沉淀试验为了优化AF16的MS灵敏性，测试了具有明显相似效率的最常见的蛋白质沉淀剂。血浆基质由1:2血浆：等渗磷酸钾缓冲液pH7.4组成，并在HPLC玻璃瓶中用以下沉淀：1:3血浆乙腈MeCN，1:4血浆：甲醇MeOH，1:3血浆:硫酸锌硫酸锌:5MNaOH10％重量体积和1:3血浆:三氯乙酸TCA10％重量体积Polson等人，2003。向样品中加入AF16和同位素标记的AF16AFIS的10μM终浓度1:2混合物。将样品密封并在3500rpm下离心。在离心后，通过UHPLC-MSMS分析上清液参见下文。在不同的时间点将相同的样品注射三次，以在10℃下用自动取样器中的给定沉淀剂探测肽稳定性。AF16在人血浆和大鼠血浆中的稳定性、动力学和代谢物鉴定血浆样品的所有温育均使用AF161mM的MeCN：H2O储备溶液和AFIS0.9mM的MeCN：H2O储备溶液1:2的混合物，这有助于新陈代谢或分解代谢产物的结构解释。在加入任何其它溶剂之前，始终将化合物混合物移液到小瓶的底部。使用合并的人合并血浆、Wistar大鼠血浆、CD-1小鼠血浆和Beagle狗血浆，在密闭的HPLC玻璃小瓶中在37℃下10μM温育浓度进行血浆中的稳定性。温育时间通常在0QC样品至2小时。在每个时间点取出等分试样并用选定的沉淀剂包括二硫苏糖醇DTT1mM最终浓度终止反应。使用UHPLC-MSMS进行相对定量与QC比较参见下文。使用多反应监控MRM、Skyline预测的MRM、Lightsight软件Sciex、增强MS扫描EMS、增强产物离子扫描EPI和增强分辨率扫描ERS进行代谢物鉴定。分析过程通过UHPLC-MSMS分析来自不同测定的所有样品，利用线性离子阱进行EMS、ERS和EPI扫描。使用以下系统；配备有与Agilent1290UHPLC相连的线性离子阱的SciexQTRAP6500三重四极质谱仪电喷雾离子化，ESI。对于色谱分离，在C18HSST31.8μm柱2x50mmWatersCorp.上使用一般梯度0％流动相B在5分钟至15分钟全运行内达到90％。流动相A由0.05％TFA0.05％甲酸组成和流动相B由100％乙腈0.05％TFA0.05％甲酸组成。流速为0.5毫升分钟。注入10μL样品并使用表5中报告的质谱设置进行运行。表5.用于检测AF16和代谢物的MRMMS特定设置。结果和讨论血浆蛋白质沉淀对AF16MS灵敏性和UHPLC色谱的影响由于血浆基质的复杂性，重要的是测试AF16色谱和质谱MS灵敏性如何响应不同的蛋白质沉淀方法。所选择的沉淀剂是通常应用的并且显示出具有相似的效率。结果显示在图10和图11中。图10显示了在20小时内重复注射相同样品三次的结果。明显的是，随着时间变化，TCA和MeCN显示出良好的表观稳定性。注意到用ZnSO4在20小时时略微消失。用MeOH显示随时间变化的显著损失。在MeOH的作用下，AF16很可能是稳定的，但损失源于肽沉淀，因为已知肽在醇混合物中会具有有限的溶解度。将进行进一步的测试。图11显示了上文获得的数据在MS-强度离子计数方面彼此比较的图。TCA沉淀显示最强的信号并设为参考。明显的是，非有机方法落后，很可能是由于共洗脱抑制离子。具有最佳稳定性的两种方法TCA和MeCN显示出超过500倍的灵敏性差异，因此对于继续研究，选择在整个研究中使用TCA。AF16的血浆稳定性AF16在不同种类中的相对稳定性如图12所示。不论种类如何，AF16迅速消失，体外半衰期t12小于或等于10分钟。因此，确定肽的分子归宿是至关重要的，以便理解任何药理作用的药代动力学基础。AF16在人血浆和大鼠血浆中的分子归宿如上所述，将AF16和相似量的同位素标记的肽在大鼠血浆和人血浆中温育。为了分析全扫描MS数据，使用来自Sciex、Lightsight的代谢物鉴定软件，其将温育的MS应答与质量控制QC样品进行比较，并将明显的峰指定为具有特定质量电荷mz值的代谢物。该软件目前不是最优地适用于多电荷化合物例如肽，因此代谢物检测的检测率相当高，必须对每个发现的峰进行人工评估。然后将最大代谢物峰面积排序，并且在一些情况下通过MSMS片段验证。Skyline方法用于预测所鉴定的肽的片段，而且也有助于创建灵敏的MRM方法，从而可以监控低的量。表6列出了在30分钟温育时鉴定的产物及其相对量。然而必须强调的是，该比较假设每种产品具有相同的MS灵敏性，该灵敏性可以不同，因此各个百分比可以改变。在查阅结果后，很明显的是，基于所鉴定的峰的相对面积，一种代谢物比其他代谢物大得多，在表6中指定为M1。然而，鉴定的质量对mz625630不对应于任何分解代谢产物预期的蛋白水解肽键切割。该对现在被鉴定为AF-16的半胱氨酸二硫化物。表6.人血浆和大鼠血浆中已鉴定的代谢物的相对面积％图13显示了鉴定的代谢物的相对动力学，并且显然在人血浆和大鼠血浆中均以相同的速度和相同的量形成半胱氨酸二硫化物M1，表明大鼠可以是药理学研究的良好模型。人与大鼠之间最大的不同是M9的形成，M9在人中随时间变化线性形成，但在大鼠中的程度非常低。对此的一种解释可以是较小片段的人血浆蛋白质水解活性高于大鼠血浆中的蛋白质水解活性。具有592.3594.4的mz对的一种代谢物M10未在表6图13中示出仍然令人费解并且在MSMS研究和ERS模式扫描后首先被理解图14。ERS显示它在13C同位素模式同位素峰之间0.3Da步骤上是三重电荷并且与M2二硫化物产物一致。M2以明显低的量形成，但这种形成可以被有效的半胱氨酸氧化所遮盖，形成二硫化物。替选地，M10由M1形成，但这不太可能。N末端缬氨酸的简单切割是非常出人意料的形成M2，因为大多数N末端作用肽酶一次切割两个氨基酸，据我们所知，很少有肽酶能够如此接近二硫键作用和形成M10。为了进一步证实这些产物M1和M10确实是二硫化物，将反应混合物与半胱氨酸选择性烷化剂N-乙基马来酰亚胺一起温育，证实了没有与这些代谢物反应未示出。考虑到DTT与TCA用于淬灭溶液的事实，图13中显示的动力学是令人惊讶的，尽管在酸性条件下DTT的还原能力可能降低。因此，当使用中性沉淀剂ZnSO4没有NaOH时，测试是否发生相同的模式。这种沉淀方法效率不高，但希望能提供有关主要二硫化物产物形成的更多信息。结果如图15所示。从图15及其与图13比较，清楚的是，没有显示出大的差异，并且M1M10二硫化物对DTT还原的弹性也是非常出人意料的。结论和未来研究已经进行了许多重要的体外试验以进一步理解AF16的体外药代动力学以及它可以如何转化为体内情况。1.三氯乙酸已经被确定为去除温育混合物中的血浆蛋白质并保持良好的MS灵敏性和色谱的最佳选择。2.由早期研究已知AF16在血浆中迅速降解。该调查进一步验证了这一点，但也表明不同物种之间的速度相似。3.大鼠血浆和人血浆中明显的主要代谢归宿显示为AF16的快速二硫化物形成。这种可逆的作用明显地保护了AF16免于快速的肽酶降解，早先已经证明了使用N-乙基马来酰亚胺稳定化的可逆性较小。这可以视为使AF16能够更高程度地到达其完整靶标的保护功能。4.M1M10二硫化物具有出人意料的对DTT还原的弹性。实施例3合成M1AF-17以能够在体外体内准确定量，而且也一般地研究体外药代动力学性质并用于药理学研究。AF-17的生物活性-在先前描述的大鼠肠袢模型中测量抗分泌活性Lange，S.1982FEMSMicrobiol.Lett.15，239-242。用3pg霍乱毒素攻击空肠袢。在用霍乱毒素攻击之前，静脉注射或肌内注射不同剂量的合成产生的AF-17、AF-16或对照＝无肽，仅缓冲液XY。五小时后记录肠袢中累积的流体的重量mgcmmgml。在至少六只大鼠中测试每种AF制剂。Fisher’sPLSD用于数据的统计分析。AF-17的生物活性-在大鼠模型中测试AF-17的生物活性。表7中显示了在用霍乱毒素肠道攻击前20秒至30秒静脉注射或肌内注射时AF-17抑制肠液分泌的能力。在仅用缓冲液注射的对照动物中，霍乱毒素引起明显的分泌，每厘米肠390mg液体。AF-17引起霍乱分泌的剂量依赖性抑制，这与对缓冲液的应答显著不同p兰特门内阿斯-法克托尔公司抗分泌因子17PS54055SE00SE1651074-52016-07-1820BiSSAP1.3.61382PRT智人全长1MetValLeuGluSerThrMetValCysValAspAsnSerGluTyrMet151015ArgAsnGlyAspPheLeuProThrArgLeuGlnAlaGlnGlnAspAla202530ValAsnIleValCysHisSerLysThrArgSerAsnProGluAsnAsn354045ValGlyLeuIleThrLeuAlaAsnAspCysGluValLeuThrThrLeu505560ThrProAspThrGlyArgIleLeuSerLysLeuHisThrValGlnPro65707580LysGlyLysIleThrPheCysThrGlyIleArgValAlaHisLeuAla859095LeuLysHisArgGlnGlyLysAsnHisLysMetArgIleIleAlaPhe100105110ValGlySerProValGluAspAsnGluLysAspLeuValLysLeuAla115120125LysArgLeuLysLysGluLysValAsnValAspIleIleAsnPheGly130135140GluGluGluValAsnThrGluLysLeuThrAlaPheValAsnThrLeu145150155160AsnGlyLysAspGlyThrGlySerHisLeuValThrValProProGly165170175ProSerLeuAlaAspAlaLeuIleSerSerProIleLeuAlaGlyGlu180185190GlyGlyAlaMetLeuGlyLeuGlyAlaSerAspPheGluPheGlyVal195200205AspProSerAlaAspProGluLeuAlaLeuAlaLeuArgValSerMet210215220GluGluGlnArgHisAlaGlyGlyGlyAlaArgArgAlaAlaArgAla225230235240SerAlaAlaGluAlaGlyIleAlaThrThrGlyThrGluAspSerAsp245250255AspAlaLeuLeuLysMetThrIleSerGlnGlnGluPheGlyArgThr260265270GlyLeuProAspLeuSerSerMetThrGluGluGluGlnIleAlaTyr275280285AlaMetGlnMetSerLeuGlnGlyAlaGluPheGlyGlnAlaGluSer290295300AlaAspIleAspAlaSerSerAlaMetAspThrSerGluProAlaLys305310315320GluGluAspAspTyrAspValMetGlnAspProGluPheLeuGlnSer325330335ValLeuGluAsnLeuProGlyValAspProAsnAsnGluAlaIleArg340345350AsnAlaMetGlySerLeuProProArgProProArgThrAlaArgArg355360365ThrArgArgArgLysThrArgSerGluThrGlyGlyLysGly37037538026PRT智人肽变型2可以被R或K替代变型3可以被L替代变型5可以被A替代2CysHisSerLysThrArg15316PRT智人肽变型3可以被R或K替代变型4可以被L替代变型6可以被A替代3ValCysHisSerLysThrArgSerAsnProGluAsnAsnValGlyLeu15101547PRT智人肽变型3可以被R或K替代变型4可以被L替代变型6可以被A替代4ValCysHisSerLysThrArg1558PRT智人肽变型4可以被R或K替代变型5可以被L替代变型7可以被A替代5IleValCysHisSerLysThrArg1565PRT智人肽变型1可以被R或K替代变型2可以被L替代变型4可以被A替代6HisSerLysThrArg15716PRT人工序列2号位Cys的二硫键变型3可以被R或K替代变型4可以被L替代变型6可以被A替代7ValCysHisSerLysThrArgSerAsnProGluAsnAsnValGlyLeu15101586PRT人工序列1号位Cys的二硫键变型2可以被R或K替代变型3可以被L替代变型5可以被A替代8CysHisSerLysThrArg1597PRT人工序列2号位Cys的二硫键变型3可以被R或K替代变型4可以被L替代变型6可以被A替代9ValCysHisSerLysThrArg151011PRT人工序列肽10ThrArgSerAsnProGluAsnAsnValGlyLeu1510116PRT人工序列肽11GluAsnAsnValGlyLeu151214PRT人工序列肽12HisSerLysThrArgSerAsnProGluAsnAsnValGlyLeu1510134PRT人工序列肽13AsnValGlyLeu1149PRT人工序列肽14SerAsnProGluAsnAsnValGlyLeu151510PRT人工序列肽15ValCysHisSerLysThrArgSerAsnPro15101615PRT人工序列肽16CysHisSerLysThrArgSerAsnProGluAsnAsnValGlyLeu1510151713PRT人工序列肽17SerLysThrArgSerAsnProGluAsnAsnValGlyLeu15101810PRT人工序列肽18ArgSerAsnProGluAsnAsnValGlyLeu1510198PRT人工序列肽19AsnProGluAsnAsnValGlyLeu15206PRT人工序列肽20GluAsnAsnValGlyLeu15

权利要求：1.一种分离重组的和或合成产生的肽、或其具有等同功能活性的药学活性盐，所述肽对应于如SEQ.ID.NO.1所示的抗分泌因子AF蛋白的片段AF和或其具有等同活性的同源物，其中，所述肽至少包含如SEQ.ID.NO.2所示的氨基酸序列AF-6和SEQ.ID.NO.2的氨基酸aa1号位的半胱氨酸二硫键，所述肽具有抗分泌活性。2.根据权利要求1所述的分离重组的和或合成产生的肽，其中，所述肽包含如SEQ.ID.NO.3所示的氨基酸序列AF-16和SEQ.ID.NO.3的氨基酸2号位的半胱氨酸二硫键。3.根据权利要求1所述的分离重组的和或合成产生的肽，其中，所述肽包含如SEQ.ID.NO.4所示的氨基酸序列AF-8和SEQ.ID.NO.4的氨基酸2号位的半胱氨酸二硫键。4.根据权利要求1至3中任一项所述的分离重组的和或合成产生的肽，所述肽是6个至25个氨基酸长，优选7个至17个氨基酸长、7个至16个氨基酸长、7个至20个氨基酸长、8个至17个氨基酸长、8个至20个氨基酸长、17个至25个氨基酸长、17个至20个氨基酸长，例如7个氨基酸长、8个氨基酸长、16个氨基酸长或17个氨基酸长。5.根据权利要求1至3中任一项所述的分离重组的和或合成产生的肽，所述肽是至少6个氨基酸长、至少7个氨基酸长、至少8个氨基酸长、至少16个氨基酸长、或至少17个氨基酸长并且是至多7个氨基酸长、至多8个氨基酸长、至多9个氨基酸长、至多10个氨基酸长、至多11个氨基酸长、至多12个氨基酸长、至多13个氨基酸长、至多14个氨基酸长、至多15个氨基酸长、至多16个氨基酸长、至多17个氨基酸长、至多18个氨基酸长、至多19个氨基酸长、至多20个氨基酸长、至多21个氨基酸长、至多22个氨基酸长、至多23个氨基酸长、至多24个氨基酸长、或至多25个氨基酸长。6.根据前述权利要求中任一项所述的分离重组的和或合成产生的肽，所述肽包含如SEQ.ID.NO.7所示的氨基酸VCCHSKTRSNPENNVGL、或如SEQ.ID.NO.8所示的氨基酸序列CCHSKTR、或如SEQ.ID.NO.9所示的氨基酸序列VCCHSKTR。7.根据前述权利要求中任一项所述的分离重组的和或合成产生的肽，所述肽由如SEQ.ID.NO.7所示的氨基酸VCCHSKTRSNPENNVGL、或如SEQ.ID.NO.8所示的氨基酸序列CCHSKTR、或如SEQ.ID.NO.9所示的氨基酸序列VCCHSKTR构成。8.根据前述权利要求中任一项所述的分离重组的和或合成产生的肽，所述肽具有至少0.2小时的t12，优选至少0.5小时、至少1小时、或至少1.5小时的t12。9.根据前述权利要求中任一项所述的分离重组的和或合成产生的肽，所述肽具有至少1.8小时的t12。10.根据前述权利要求中任一项所述的分离重组的和或合成产生的肽，用于医疗。11.根据前述权利要求中任一项所述的分离重组的和或合成产生的肽，用于治疗和或预防选自由以下组成的列表中的疾病和病症：病理性流体运输、感染、炎症、炎症反应、TBI、TBI相关的病症和症状、肿瘤、肿瘤相关的并发症、癌症、间室综合征、胶质母细胞瘤、糖尿病、和腹泻。12.根据前述权利要求中任一项所述的分离重组的和或合成产生的肽，用于优化活性物质的细胞摄取、用于神经保护和或用于使calveola正常化。13.根据前述权利要求中任一项所述的分离重组的和或合成产生的肽，用于治疗和或预防TBI和或选自继发性脑损伤的TBI相关的病症或症状。14.根据前述权利要求中任一项所述的分离重组的和或合成产生的肽，用于治疗和或预防获得性脑损伤。15.一种药物组合物，所述药物组合物包含根据前述权利要求中任一项所述的分离重组的和或合成产生的肽、以及适当的药物载体。16.根据权利要求14所述的药物组合物，用于治疗和或预防选自由以下组成的列表中的疾病和病症：病理性流体运输、感染、炎症、炎症反应、TBI、TBI相关的病症、肿瘤、肿瘤相关的并发症、癌症、间室综合征、胶质母细胞瘤、糖尿病、和腹泻。17.根据权利要求14所述的药物组合物，用于优化活性物质的细胞摄取、用于神经保护和或用于使calveola正常化。18.根据权利要求14所述的药物组合物，用于治疗和或预防TBI、例如TBI相关的继发性脑损伤，或用于治疗和或预防获得性脑损伤。19.一种用于治疗和或预防选自由以下组成的列表中的疾病和病症的方法：病理性流体运输、感染、炎症、炎症反应、TBI、TBI相关的病症、肿瘤、肿瘤相关的并发症、癌症、间室综合征、胶质母细胞瘤、糖尿病、和腹泻，所述方法包括给有此需要的患者施用有效量的根据权利要求1至13中任一项所述的分离重组的和或合成产生的肽、或根据权利要求14所述的药物组合物。20.一种用于优化活性物质的细胞摄取、用于神经保护和或用于使calveola正常化的方法，所述方法包括给有此需要的患者施用有效量的根据权利要求1至13中任一项所述的分离重组的和或合成产生的肽、或根据权利要求14所述的药物组合物。21.一种用于治疗和或预防TBI和或TBI相关的继发性脑损伤的方法，所述方法包括给有此需要的患者施用有效量的根据权利要求1至13中任一项所述的分离重组的和或合成产生的肽、或根据权利要求14所述的药物组合物。22.一种用于治疗和或预防获得性脑损伤的方法，所述方法包括给有此需要的患者施用有效量的根据权利要求1至13中任一项所述的分离重组的和或合成产生的肽、或根据权利要求14所述的药物组合物。23.一种针对肽的抗体，所述肽基本上具有SEQ.ID.NO.7、SEQ.ID.NO.8或SEQ.ID.NO.9所示的氨基酸序列。24.一种针对肽的抗体用于在生物体中检测所述蛋白质或其同源物或片段的用途，所述肽基本上具有SEQ.ID.NO.7、SEQ.ID.NO.8或SEQ.ID.NO.9所示的氨基酸序列。25.一种编码肽的核酸用于产生相应肽的用途，所述肽基本上具有SEQ.ID.NO.1至SEQ.ID.NO.9中任一者所示的氨基酸序列，其中，所述肽包含SEQ.ID.NO.1的氨基酸序列aa36号位的半胱氨酸二硫键、SEQ.ID.NO.2的氨基酸aa1号位的半胱氨酸二硫键、SEQ.ID.NO.3的氨基酸aa2号位的半胱氨酸二硫键、或SEQ.ID.NO.4的氨基酸aa2号位的半胱氨酸二硫键，所述肽具有抗分泌活性。

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