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一种肠炎沙门菌pipC基因缺失菌株及其应用 

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申请/专利权人:河北科技师范学院

摘要:本发明公开了一种肠炎沙门菌pipC基因缺失菌株及其应用。涉及基因工程技术领域。提供了其构建方法、应用。本发明通过体外应激试验,发现pipC基因缺失株抵抗酸,碱和氧化应激能力显著降低;通过细胞侵袭及胞内存活试验,发现pipC基因缺失后肠炎沙门菌的侵袭能力和胞内存活能力显著降低,证明pipC基因与侵袭相关。通过小鼠半数致死量和器官载菌量试验,发现pipC基因影响肠炎沙门菌的毒力;同时通过免疫保护试验和淋巴细胞转化试验,结果显示pipC缺失株对小鼠具有显著的免疫保护能力;通过检测细胞因子水平的变化和检测IgG、IgA的水平,结果显示,pipC缺失株免疫后小鼠的细胞免疫和体液免疫水平显著上升。

主权项:1.一种肠炎沙门菌pipC基因缺失菌株的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:1将pKD46质粒转化到肠炎沙门菌C50336,得到C50336pKD46菌株;2利用pKD3作为模板,用P1和P2引物克隆带有pipC基因同源臂和cat基因的片段,命名为cat,并将cat电转化到C50336pKD46菌株中,得一次重组阳性菌株;3将获得的一次重组阳性菌株消除pKD46质粒,得到菌株C50336ΔpipC::cat;4将pCP20质粒转化到C50336ΔpipC::cat中,得到二次重组菌株C50336ΔpipC。

全文数据:

权利要求:

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