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申请/专利权人:中国科学院北京基因组研究所(国家生物信息中心)
摘要:一种在来源于细胞的核酸分子中引入双重细胞特异性标签的方法,以及基于所述方法构建用于单细胞转录组测序、单细胞染色质可及性测序或单细胞转录组+染色质可及性多组学测序的核酸分子文库,或,对单细胞转录组、单细胞染色质可及性或单细胞转录组+染色质可及性多组学进行高通量测序的方法。还提供了利用所述方法构建的核酸分子文库,以及用于实施所述方法的试剂盒。
主权项:1.一种标记来自细胞或细胞核的核酸分子的方法,其包括下述步骤:1提供多个经固定和透化的细胞或细胞核,所述细胞或细胞核含有待标记的核酸分子;和,多个偶联了多个第一寡核苷酸分子的珠粒,其中,所述第一寡核苷酸分子含有第一标签序列;并且,同一个珠粒上的所述多个第一寡核苷酸分子具有相同的第一标签序列,并且,不同珠粒上的所述第一寡核苷酸分子具有彼此不同的第一标签序列;2将多个所述珠粒和多个所述细胞或细胞核随机分配至不同的第一离散分区,在所述第一离散分区内使所述第一寡核苷酸分子从所述珠粒上释放并与所述细胞或细胞核接触,从而在所述细胞或细胞核内生成衍生自所述待标记核酸分子的第一核酸分子,所述第一核酸分子含有所述第一标签序列或其互补序列;3将源自不同所述第一离散分区的包含所述第一核酸分子的细胞或细胞核混合并重新分配到不同的第二离散分区;4在所述第二离散分区内,使含有第二标签序列的第二寡核苷酸分子与所述第一核酸分子接触,生成含有第一标签序列或其互补序列以及第二标签序列或其互补序列的第二核酸分子;其中,同一个所述第二离散分区的所述第二寡核苷酸分子具有相同的第二标签序列,并且,不同所述第二离散分区的所述第二寡核苷酸分子具有彼此不同的第二标签序列;其中,所述细胞为天然存在的细胞或重组细胞,或两者的混合;所述细胞核为源自天然存在的细胞的细胞核或重组细胞的细胞核,或两者的混合。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 中国科学院北京基因组研究所(国家生物信息中心) 用于高通量标记细胞核酸分子的方法和试剂盒
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