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申请/专利权人：西藏金仑藏药开发有限公司
摘要：本发明公开了一种溶栓酶的固体发酵制备方法，涉及溶栓酶发酵制备技术领域；为了解决提取溶栓酶时搅拌分离时间较长，从而影响提取后的溶栓酶活性的问题；具体包括如下步骤：将西藏豌豆清洗杀菌后，均匀放置在培养皿中，加入水和霉孢子粉对豌豆进行发酵，随后取发酵得到的菌丝种植在斜面培养基上，将西藏豌豆煮熟后碾碎，形成种子培养基，将S1中种植的豌豆菌丝取下种植到种子培养基中进行培养，将西藏豌豆制作成固体发酵培养基。本发明无需将发酵培养得到的固体发酵物与硫酸铵溶液之间进行长时间混合搅拌，在提高提取出的溶栓酶活性的同时，减小了溶栓酶提取的操作复杂度，从而提高溶栓酶提取效率。
主权项：1.一种溶栓酶的固体发酵制备方法，其特征在于，包括如下步骤：S1：菌种斜面培养：将西藏豌豆清洗杀菌后，均匀放置在培养皿中，加入水和霉孢子粉对豌豆进行发酵，随后取发酵得到的菌丝种植在斜面培养基上；S2：种子种植：将西藏豌豆煮熟后碾碎，形成种子培养基，将S1中种植的豌豆菌丝取下种植到种子培养基中进行培养；S3：固体发酵培养基制作：将西藏豌豆制作成固体发酵培养基，随后将种植有豌豆菌丝的种子培养基移栽到固体发酵培养基中；S4：粗酶液提取：将固体发酵培养基中培养的固体发酵物取下，碾碎后与硫酸铵溶液混合，随后静置2-4h，得到粗酶液；S5：溶栓酶分离：将粗酶液放置于冰箱内，在2-4摄氏度下静置12h，随后在2-4摄氏度条件下，以12000rmin离心25-30min，取上清液为酶溶液；S6：溶栓酶纯化：将获得的酶溶液进行SephadexG-75柱层析和CMC离子交换柱层析，用离子强度pH线性梯度洗脱，获得由西藏豌豆发酵提取的溶栓酶。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 西藏金仑藏药开发有限公司 一种溶栓酶的固体发酵制备方法
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