买专利卖专利找龙图腾，真高效！ 查专利查商标用IPTOP,全免费！专利年费监控用IP管家,真方便！

申请/专利权人：上海烟草集团有限责任公司

摘要：本发明提供一种同时测定烟草中氨基酸、Amadori化合物及Heyns化合物的分析方法，包括如下步骤：1配制混合标准工作溶液，加入内标溶液，进行LC‑MSMS分析，计算得到标准工作曲线的回归方程；2将烟叶和或烟丝样品进行前处理得到待测样品溶液；3进行液相色谱‑串联质谱法分析，将获得的各种化合物与内标的色谱峰面积比，代入标准工作曲线的回归方程，并根据内标物的已知浓度，计算得到样品溶液中相应氨基酸、Amadori化合物及Heyns化合物的含量。本发明操作简单、快速，准确度及灵敏度高，重现性及回收率好，能够实现20种游离氨基酸、5种Amadori化合物及5种Heyns化合物的同时测定。

主权项：1.一种同时测定烟草中氨基酸、Amadori化合物及Heyns化合物的分析方法，其特征在于，包括如下步骤：1）配制氨基酸、Amadori化合物及Heyns化合物的混合标准工作溶液，加入内标溶液，进行LC-MSMS分析，计算得到各种氨基酸、Amadori化合物及Heyns化合物的标准工作曲线的回归方程；所述氨基酸为20种，包括天冬氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸、脯氨酸、精氨酸、组氨酸、谷氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、天门冬酰胺、谷氨酰胺、甘氨酸、蛋氨酸、L-高丝氨酸和胱氨酸；所述Amadori化合物为5种，包括1-脱氧-1-L-天冬酰胺-D-果糖、1-脱氧-1-L-丙氨酸-D-果糖、1-脱氧-1-L-脯氨酸-D-果糖、l-脱氧-1-L-色氨酸-D-果糖和1-脱氧-1-L-丝氨酸-D-果糖；所述Heyns化合物为5种，包括2-脱氧-2-L-天冬酰胺-D-葡萄糖、2-脱氧-2-L-丙氨酸-D-葡萄糖、2-脱氧-2-L-脯氨酸-D-葡萄糖、2-脱氧-2-L-色氨酸-D-葡萄糖和2-脱氧-2-L-丝氨酸-D-葡萄糖；2）将烟叶和或烟丝样品进行干燥、研磨和过筛，得到烟末；然后加入甲醇水盐酸溶液，进行萃取和离心，得到滤液；向所述滤液中加入内标溶液并用稀释溶剂进行稀释，得到待测样品溶液；所述干燥为冷冻干燥；所述研磨为冷冻研磨；3）将所述待测样品溶液进行液相色谱-串联质谱法分析，将获得的各种氨基酸、Amadori化合物及Heyns化合物与内标的色谱峰面积比，代入步骤1）中相应各种氨基酸、Amadori化合物及Heyns化合物的标准工作曲线的回归方程，并根据内标物的已知浓度，计算得到样品溶液中相应氨基酸、Amadori化合物及Heyns化合物的含量；所述液相色谱-串联质谱法中，液相色谱条件为：色谱柱为Ascentis®ExpressF5色谱柱，规格为15cm×3mm，粒径2.7μm；柱温：30~60oC；进样量：1~10μL；流动相A：0.05~0.2v%甲酸水溶液；流动相B：0.05~0.2v%甲酸乙腈溶液；流速：0.2~0.4mLmin；梯度洗脱程序：0～2min10%B，2～4min10%～100%B，4～7min100%B，7～9min100%～10%B，9～20min10%B；质谱条件为：电离方式：电喷雾离子源；电离模式：正离子模式，多反应监测模式；毛细管电压：4000~6000V；碰撞气：N2；雾化器压力：20~40psi；干燥气温度：300~400oC；流速：10~15Lmin。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 上海烟草集团有限责任公司 一种同时测定烟草中氨基酸、Amadori化合物及Heyns化合物的分析方法