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一种茶轮斑病菌原生质体的再生方法 

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申请/专利权人:武夷学院

摘要:本发明公开了一种茶轮斑病菌原生质体的再生方法,属于微生物工程技术领域,本发明利用PEG‑Ca2+介导的方法对茶轮斑病原菌进行GFP遗传转化,在国内首次建立了茶轮斑病原菌的原生质体转化体系,并获得了稳定遗传的GFP转化菌。茶轮斑病原菌原生质体转化体系的建立为探索茶轮斑致病的相关基因奠定了基础;为后续追踪茶轮斑病原的侵染和定殖提供了材料;为茶轮斑病菌与茶树的分子互作机制的研究提供了基础;为茶轮斑病的防止提供了新的研究路径;为类似真菌的转化机制提供了新的参考。

主权项:1.一种茶轮斑病菌原生质体的再生方法,其特征在于,包括以下步骤:以茶轮斑病菌浸染的病变叶片为原料,制备得到茶轮斑病菌培养液;取茶轮斑病菌培养液培养得到菌丝体,向所述菌丝体中加入溶壁酶液,得到裂解液,除杂,得到原生质体;向所述原生质体加入带有绿色荧光基因的质粒,混匀,加入含有聚乙二醇和钙离子的缓冲液,混匀,再加入PD培养基,于25~28℃摇床培养,利用PEG-Ca2+介导法将带有绿色荧光基因的质粒导入所述原生质体中,加入含抗生素的PDA培养基,于25~28℃,3500~4500Lux光照培养,得到再生原生质体。

全文数据:

权利要求:

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