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申请/专利权人：青岛科技大学

摘要：本发明公开了一种基于酶辅助的同时检测两种miRNA的生物传感器及其构建方法，其包括纳米探针MBH和纳米探针LCAH，纳米探针MBH包括发夹DNAH1、发夹DNAH2和链霉亲和素功能化磁珠MB，发夹DNAH1和发夹DNAH2的3’端修饰的生物素与磁珠MB表面的链霉亲和素结合，发夹DNAH1特异性识别miRNA‑21；纳米探针LCAH包括氨基修饰的金纳米粒子、羧基修饰的硒化铬量子点CdSeQDs、脂质体LCA和发夹DNAH3，金纳米粒子上的氨基和硒化铬量子点CdSeQDs上的羧基结合形成CdSe@Au量子点CA，CdSe@Au量子点CACA包埋在LCA的空腔内形成CdSe@Au量子点负载的脂质体，发夹DNAH3通过的3’端修饰的巯基连接在CdSe@Au量子点负载的脂质体表面，发夹DNAH3特异性识别miRNA‑155。其提供了一种构建快速、低成本、高灵敏度的同时对miRNA‑21和miRNA‑155进行检测的方法。

主权项：1.一种基于酶辅助的同时检测两种miRNA的生物传感器，其特征在于，包括纳米探针MBH和纳米探针LCAH，其中，纳米探针MBH包括发夹DNAH1、发夹DNAH2和链霉亲和素功能化磁珠MB，发夹DNAH1和发夹DNAH2的3’端修饰的生物素与磁珠MB表面的链霉亲和素结合，发夹DNAH1特异性识别miRNA-21；纳米探针LCAH包括氨基修饰的金纳米粒子、羧基修饰的硒化铬量子点CdSeQDs、脂质体LCA和发夹DNAH3，金纳米粒子上的氨基和硒化铬量子点CdSeQDs上的羧基结合生成酰胺键，形成CdSe@Au量子点CA，CdSe@Au量子点CACA包埋在LCA的空腔内形成CdSe@Au量子点负载的脂质体，发夹DNAH3通过的3’端修饰的巯基连接在CdSe@Au量子点负载的脂质体表面，发夹DNAH3特异性识别miRNA-155，其中，H2包括H2-a和H2-b，H2-a的3’端与H2-b的5’端连接，且在连接处插入rA切割位点，其中，DNAH1、DNAH2-a、DNAH2-b和DNAH3的序列如下：DNAH1：5’-GCTTATCACACTGATCCGAGCCGGTCGAAAACTCAGTGTCAACATCAGTCTGATAAGCTATTTTTT-3’；DNAH2-a：5’-GACTGCACTGAGTT-3’；DNAH2-a：5’-GTCAGTGTGAAACCCCTAGTGCAGTCTTTTTT-3’；DNAH3：5’-GATACCCCTATCACGATTAGCATTAACTGCACAAGGGGTATCACACTTTTTT-3’。

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百度查询： 青岛科技大学 一种基于酶辅助的同时检测两种miRNA的生物传感器及其构建方法