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申请/专利权人：深圳市绿诗源生物技术有限公司
摘要：本发明公开了一种新型氟尼辛半抗原的制备方法及应用，涉及化学技术领域，设计合成了小分子目标分析物半抗原，并与载体蛋白质偶联，制备有效人工抗原，免疫动物制备对小分子分析物特异性抗体，利用抗原抗体的特异性免疫学反应和易被检测识别的标记物的放大作用，从而定性定量的检测样本中超微量小分子目标物，可用于样本测定，通过此半抗原制备的单克隆抗体，可以特异性识别氟尼辛和及其代谢物5‑羟基氟尼辛，该半抗原最大限度保留了两者共同的化学结构，提高了半抗原的特异性和灵敏度，又为抗原制备加入了反应位点。
主权项：1.一种5-氨基氟尼辛半抗原的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：取2-氯-5-硝基烟酸2.1g，2-甲基-3-三氟甲基苯胺2.6g，加入20mL的DMF搅拌溶解；然后加入氢氧化钠0.8g，升温至60℃反应6～8小时，降至室温，加入50mL的冰水，用乙酸乙酯进行萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥后，旋干乙酸乙酯，得5-硝基氟尼辛粗品，经乙醇重结晶得纯品；S2：称取1.7g5-硝基氟尼辛，装入容积为250mL三口圆底烧瓶底部，随后向瓶底边搅拌边加入100mL苯，待5-硝基氟尼辛被苯溶解后再加入2.6g纯锌粉，搅拌均匀后分次加入8mL浓HCl，室温搅拌30min后再次加入2.6g纯锌粉，室温搅拌反应8h，薄板层析法TLC监测反应直至反应完全；S3：反应结束后，将100mL冷水加入反应体系，并用2MNaOH溶液中和至弱酸性；S4：静置1h后分离并保留苯层，再用苯萃取水层，合并萃取液，有机相经水洗后用无水硫酸钠脱水干燥以除去多余的水分，有机相减压蒸馏以除去苯，得到的粗品再用硅胶柱层析纯化后得到淡黄色固体5-氨基氟尼辛半抗原。
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权利要求：
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