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申请/专利权人：浙江洪晟生物科技股份有限公司;江苏省农业科学院;新昌县天姥实验室

摘要：本发明公开了一种猪δ冠状病毒灭活疫苗制备方法及其应用，属于兽用生物制品领域。本发明要解决的技术问题是：如何有效的预防猪δ冠状病毒所引起的猪腹泻。为解决该技术问题，本发明提供一种猪δ冠状病毒灭活疫苗及其制备方法，所述疫苗包含灭活的猪δ冠状病毒。本发明所提供的疫苗能够有效预防由猪δ冠状病毒引起的猪腹泻。

主权项：1.一种猪δ冠状病毒灭活疫苗的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：S1使用ST全悬浮细胞培养猪传猪δ冠状病毒LYG14株，获得病毒的培养液；S2将S1制备的病毒的培养液灭活，获得灭活的病毒的培养液；使用除菌PBS缓冲液将灭活的病毒液稀释至107.0TCID50ml，作为抗原液；S3将S2制备的抗原液与佐剂按质量比为8:2的比例混合，获得猪δ冠状病毒灭活疫苗；其中所述猪δ冠状病毒LYG14株是在中国典型培养物保藏中心保藏的猪δ冠状病毒，其保藏编号为CCTCCNO:V202369；所述ST全悬浮细胞是在中国典型培养物保藏中心保藏的ST全悬浮细胞，其保藏编号为：CCTCCNO:C2023179；所述的步骤S1中使用ST全悬浮细胞培养猪传猪δ冠状病毒LYG14株包括以下步骤：1ST全悬浮细胞在无血清培养基中的逐级放大培养；2将放大培养的ST全悬浮细胞转入生物反应器中在无血清培养基中进行发酵培养，当细胞密度达6.0×106个ml以上时，使用含终浓度为20～30μgml胰酶的无血清培养基稀释至4.0×106个ml，按照MOI为0.005～0.01接入种毒，设置培养参数：pH值为7.2、DO值为40～50％、温度为37℃、转速为80～100rmin，培养24～36小时收获细胞培养物；3将收获的细胞培养物在无菌条件下去除细胞碎片，即为病毒的培养液，取样进行病毒含量和无菌检验，将病毒液置于-15℃以下保存待用。

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百度查询： 浙江洪晟生物科技股份有限公司 江苏省农业科学院 新昌县天姥实验室 猪δ冠状病毒灭活疫苗制备方法及其应用