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申请/专利权人：中国中医科学院针灸研究所
摘要：本申请涉及组织切片技术领域，提供了一种动物穴位切片处理方法及其应用，所述方法包括穴位标记、体位固定、心脏灌流、离断肢体并浸泡固定、脱钙修整、切片、免疫荧光染色以及透明化处理；本发明的穴位切片包含骨组织，通过获取动物上肢或下肢的对称穴位并进行脱钙处理，避免切片时产生骨碎片影响观察和拍摄，对于需要依靠骨性标志来定位的穴位，其观察及拍摄位置更加准确，且观察内容可扩展到更加完备的“皮肤‑皮下组织‑肌肉‑骨膜‑骨”；同时获取动物肢体对称穴位的冠状位和矢状位的厚组织切片，可以充分观察穴区局部神经纤维、血管以及免疫细胞等的分布特点和空间对应关系，从而比较生理、病理以及针灸干预后的穴区局部变化。
主权项：1.一种动物穴位切片处理方法，其特征在于，所述方法包括：S1：根据动物体表标志在动物体表确定目标穴位，使用留置针灸针或点刺墨水在体表皮肤所述目标穴位处进行标记处理；所述目标穴位为动物上肢的对称穴位或动物下肢的对称穴位；S2：选择与所述目标穴位对应的固定体位和固定方式对动物进行体位固定；S3：对体位固定后的动物使用4%的多聚甲醛进行心脏灌流固定；S4：离断与所述目标穴位对应的动物部分肢体，于4%多聚甲醛浸泡12-16h后取出，用1XPBS清洗3次，每次20min；S5：将清洗后的与所述目标穴位对应的动物部分肢体放至50mL脱钙液中，于恒温摇床脱钙3-5d，温度设定36.5-37.5℃，转速60-80rpm;待骨组织可被针穿透时，取出所述目标穴位对应的动物部分肢体，用1XPBS清洗3次，每次20min；S6：修整与所述目标穴位对应的动物部分肢体，包埋于2%琼脂中，使用振动切片机对一侧动物部分肢体沿冠状位切取1-2mm厚的环形观察组织，使用振动切片机对另一侧动物部分肢体沿矢状位切取1-2mm厚的矩形观察组织；S7：对所述环形观察组织和矩形观察组织进行免疫荧光染色处理以及透明化处理。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 中国中医科学院针灸研究所 一种动物穴位切片处理方法及其应用
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