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申请/专利权人：浙江大学

摘要：本发明公开了一种评价多种热加工污染物暴露的尿液生物标志物同步检测方法及应用，属于分析检测技术领域，热加工污染物包括丙烯酰胺、糠醛、糠醇、5‑HMF和3‑MCPD，方法包括：取尿液样品，加入各热加工污染物对应的尿液生物标志物内标，再加入甲酸和甲酸铵，涡旋离心取上清液过活化平衡后的固相萃取柱，再经淋洗和洗脱得到洗脱液，洗脱液经处理后得到待测样品溶液；再采用超高效液相色谱串联质谱技术检测待测样品溶液中各尿液生物标志物。该方法分析时间短、灵敏度高、检测精度高，能实现AAMA、GAMA、iso‑GAMA、AAMA‑sul、HMFA、HMFG、N2FG和DHPMA共8种尿液生物标志物的同步定量分析。

主权项：1.一种评价多种热加工污染物暴露的尿液生物标志物同步检测方法，其特征在于，所述的热加工污染物包括丙烯酰胺、糠醛、糠醇、5-HMF和3-MCPD，对应的尿液生物标志物包括N-乙酰-S-2-氨基甲酰乙基-L-半胱氨酸AAMA、N-乙酰-S-2-氨基甲酰-2-羟乙基-L-半胱氨酸GAMA、N-乙酰-S-1-氨基甲酰-2-羟乙基-L-半胱氨酸iso-GAMA、N-乙酰-S-2-氨基甲酰乙基-L-半胱氨酰亚砜AAMA-sul、N-2-糠酰甘氨酸N2FG、5-羟甲基-2-呋喃甲酸HMFA、5-羟甲基-2-糠酰甘氨酸HMFG和2,3-二羟丙基巯基尿酸DHPMA；方法包括以下步骤：1样品预处理：取尿液样品，加入各热加工污染物对应的尿液生物标志物内标，再加入甲酸和甲酸铵，涡旋后离心，取上清液过活化平衡后的IsoluteENV+固相萃取柱，再经淋洗和洗脱后得到洗脱液，洗脱液经氮吹、复溶、过膜后得到待测样品溶液；2采用超高效液相色谱串联质谱技术检测待测样品溶液，得到待测样品溶液中各尿液生物标志物和尿液生物标志物内标的峰面积，代入到相应的标准曲线中，得到尿液样品中各尿液生物标志物的含量；超高效液相色谱条件：以甲酸水溶液为流动相A，甲酸乙腈溶液为流动相B，洗脱程序为：0～4.5min，2％流动相B；4.5～7.0min，2％～100％流动相B；7.0～9.0min，100％流动相B；9.0～9.1min，100％～2％流动相B；9.1～15.0min，2％流动相B；质谱条件：采用电喷雾方式进行离子化，以多重反应监测模式进行负离子扫描。

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