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申请/专利权人:尚科生物医药(上海)有限公司
摘要:本发明公开了一种微生物全细胞合成圣草酚的方法。本发明通过在细胞体系内转入来源于大肠杆菌的HpaB和HpaC基因,形成合成圣草酚的通路;再向细胞内引入来源于产氨棒杆菌的FMNFAD合成酶基因,从而实现细胞内FADFMN的提供;最后在发酵培养过程中加入IPTG诱导剂、柚皮素和核黄素等,实现高浓度的圣草酚合成。本发明公开的方法提高了圣草酚的合成浓度,达到2231mgL,操作简单,实现了利用合成生物学理念构建圣草酚的合成。
主权项:1.一种微生物全细胞合成圣草酚的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:1)将来源于大肠杆菌的HpaB和HpaC基因构建到质粒pRSFDuet载体上,通过抗性筛选获得含有上述两个基因的细胞;2)将FMNFAD合成酶基因连接到pET28a载体上的多克隆位点区域,然后将该重组载体转入到步骤1中得到的细胞内;3)将步骤2中构建成功的细胞转入含有多种抗生素的培养基中进行发酵培养;4)向培养基中加入IPTG诱导剂、柚皮素和核黄素,进而高效合成圣草酚。
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权利要求:
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