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一种利用甲酸为唯一碳源的大肠杆菌制备绿色甲醇的方法 

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申请/专利权人:广州新鑫生物科技有限公司

摘要:本发明提出一种通过以甲酸为唯一碳源的大肠杆菌制备绿色甲醇的方法,包括以下步骤:①构建大肠杆菌BL21体内的甲醛代谢主通路。合成乙酰辅酶A合酶(Acs)和乙醛脱氢酶(Acdh)的编码基因,将两种酶基因在大肠杆菌BL21中过表达,得到可以将甲酸转化为甲醛的大肠杆菌BL21(JQ);②构建大肠杆菌BL21体内的甲醛代谢协同通路。合成乙醇醛合酶(Gals)、乙酰磷酸合酶(Acps)和磷酸乙酰转移酶(PTA)的编码基因,将三种酶的基因共表达,并转入大肠杆菌BL21(JQ)中,形成甲醛合成的协同通路,得到以甲酸为唯一碳源合成甲醛的大肠杆菌FC2020,③甲醛歧化为甲醇。大肠杆菌FC2020发酵产生的甲醛经过歧化反应,即可得到甲醇。本发明对甲酸转化为甲醛的效率为62%,发酵产量为平均体量产甲醛200mlh,甲醛歧化为甲醇的转化率达82%。本发明的制备条件对环境友好,转化率高,是生产绿色甲醇的良好方法。

主权项:1.本发明提出一种通过以甲酸为唯一碳源的大肠杆菌制备绿色甲醇的方法,包括以下步骤:①构建大肠杆菌BL21体内的甲醛代谢主通路。克隆乙酰辅酶A合酶(Acs)和乙醛脱氢酶(Acdh)的编码基因,并以半合理设计策略对分子结构进行了优化,将两种酶基因在大肠杆菌BL21中过表达,得到可以将甲酸转化为甲醛的大肠杆菌BL21(JQ);②构建大肠杆菌BL21体内的甲醛代谢协同通路。克隆乙醇醛合酶(Gals)、乙酰磷酸合酶(Acps)和磷酸乙酰转移酶(PTA)的编码基因,半合理设计策略对分子结构进行了优化,将三种酶的基因共表达,并转入大肠杆菌BL21(JQ)中,形成甲醛合成的协同通路,得到以甲酸为唯一碳源合成甲醛的大肠杆菌FC2020;③甲醛歧化为甲醇。大肠杆菌FC2020发酵产生的甲醛经过歧化反应,即可得到甲醇。

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