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申请/专利权人:纳美信(上海)生物科技有限公司
摘要:本发明公开了一种环状RNA的制备和其专用载体及应用。本发明提供了一种制备表达目标蛋白的环状RNA的方法,为将配体添加至前体RNA编码区的非环化区域中任一组分的上游或下游,且所述前体RNA编码区的环化区域不含有所述配体,待所述前体RNA编码区体外转录并环化后,得到含有环状RNA的转录产物,再通过与所述配体结合的受体纯化所述环状RNA;本发明的实验证明,本发明提供了一种获得环状RNA的新方法,包括用于纯化环状RNA的载体设计、环状RNA的制备及纯化过程,实现非RNaseR酶切依赖的环状RNA纯化方法,为环状RNA的制备提供了一种经济、便捷且高效的方法。
主权项:1.一种制备表达目标蛋白的环状RNA的方法,为将配体添加至前体RNA编码区的非环化区域中任一组分的上游或下游,且所述前体RNA编码区的环化区域不含有所述配体,待所述前体RNA编码区体外转录并环化后,得到含有环状RNA的转录产物,再通过与所述配体结合的受体纯化所述环状RNA;所述前体RNA编码区依次包括:5’同源臂、3’内含子、外显子2、5’内部同源臂、5’间隔子、IRES序列、目标蛋白编码序列、3’间隔子、3’内部同源臂、外显子1、5’内含子和3’同源臂;其中各个所述外显子和其对应相邻的内含子连接处为自剪接位点;所述前体RNA编码区的环化区域为两个自剪接位点内部的序列;所述前体RNA编码区的非环化区域为两个自剪接位点外部的序列;所述前体RNA编码区的非环化区域中组分包括5’同源臂、3’内含子、5’内含子和3’同源臂。
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百度查询: 纳美信(上海)生物科技有限公司 一种环状RNA的制备和其专用载体及应用
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