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合成羟基四氢嘧啶的重组大肠杆菌及其应用 

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申请/专利权人:江南大学

摘要:本发明公开了合成羟基四氢嘧啶的重组大肠杆菌及其应用,属于基因工程和生物工程技术领域。本发明通过在大肠杆菌中过表达羟基四氢嘧啶合成相关基因,构建5‑羟基四氢嘧啶生物合成途径,并过表达途径中的强化基因以调节胞内代谢通路,并将sucA天然启动子替换成生长期依赖性启动子,以重新动态分布α‑酮戊二酸节点的代谢通量,平衡细胞生长和羟基四氢嘧啶生产之间的需求,并优化5‑羟基四氢嘧啶生物合成的碳源使用。使构建的重组大肠杆菌摇瓶发酵产量达到3.4±0.2gL,5‑L发酵罐上发酵产量达到58.0±1.4gL,在大肠杆菌中实现了异源的、无需高盐诱导的羟基四氢嘧啶的高效合成。

主权项:1.合成羟基四氢嘧啶的基因工程菌,其特征在于,在出发菌株的基因组上整合了来源于伸长盐单胞菌Halomonaselongata的天冬氨酸半醛脱氢酶基因asd和天冬氨酸激酶基因lysCT311I,并使用游离质粒表达羟基四氢嘧啶合成关键基因,并将sucA基因的天然启动子替换为生长期依赖性启动子;所述生长期依赖性启动子包括PrpsL启动子、PrpsTP1启动子或PrrnCP1启动子。

全文数据:

权利要求:

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