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申请/专利权人：西湖大学

摘要：本发明涉及光纤生物传感技术领域，公开了一种中和抗体的生物传感检测方法及检测系统。本发明提供中和抗体的生物传感检测方法及检测系统，基于光纤生物层干涉技术，结合有效的信号放大，建立快速、高灵敏性、简便、可定量的全自动光学生物传感检测方法和检测系统，可用于对人血清中的新冠中和抗体的检测和以干血斑取样方法获得的全血样本中的新冠中和抗体等的检测。本发明所提供的中和抗体的生物传感检测方法及检测系统为临床提供了一项具有临床适用价值的体外诊断平台。

主权项：1.一种中和抗体的生物传感检测方法，其特征在于，包括：（1）制备待测样本与RBD-HRP的混合液：获得待测者的血清或干血斑全血，作为待测样本；将待测样本稀释后与RBD-HRP偶联物混合，得到待测样本与RBD-HRP的混合液，对待测者血清或干血斑全血稀释至80~120倍，所述RBD-HRP偶联物的浓度为0.067µgmL~0.4µgmL；（2）制备光纤探针：将生物素化的hACE2作为抗原，固定至链霉亲和素芯片表面，得到光纤探针；（3）抗体捕获与检测：使所述光纤探针接触所述待测样本与RBD-HRP的混合液，所述混合液中的RBD-HRP偶联物特异性地与所述光纤探针上的hACE2抗原结合；（4）信号放大：使所述光纤探针接触信号放大剂DAB，所述光纤探针上的HRP与DAB高亲和力结合，产生金属沉淀，带来光纤表面的光谱红移，得到待测样本的光谱位移；（5）获得标准曲线：采用兔源性中和性单克隆抗体r-NAb-RBD作为中和抗体的参照抗体，添加所述参照抗体于健康者的稀释后的血清或干血斑全血中，获得不同抗体浓度的参照样本；参照上述步骤（1）制备不同抗体浓度的参照样本与RBD-HRP的混合液，采用上述步骤（2）中制备的光纤探针，参照上述步骤（3）和（4）对所述不同抗体浓度的参照样本与RBD-HRP的混合液分别进行抗体捕获与检测、信号放大，得到不同抗体浓度的参照样本的光谱位移；以参照抗体的浓度为X轴，以相对抑制性为Y轴，绘制“浓度-相对抑制性”线性标准曲线；不同抗体浓度的参照样本的相对抑制性的计算以零抗体浓度的参照样本的光谱位移为参照，公式如下：某抗体浓度的参照样本的相对抑制性={1–某抗体浓度的参照样本的光谱位移零抗体浓度的参照样本的光谱位移}×100%；（6）获得待测样本的中和抗体浓度：根据待测样本的相对抑制性以及所述“浓度-相对抑制性”线性标准曲线，得出待测样本中的中和抗体浓度，其中，待测样本的相对抑制性={1–待测样本的光谱位移零抗体浓度的参照样本的光谱位移}×100%。

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