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申请/专利权人:北京擎科生物科技股份有限公司
摘要:本申请提供了一种寡核苷酸的合成方法;所述合成方法包括如下步骤:脱保护步骤、偶联步骤、加帽步骤和氧化步骤;其中,在所述氧化步骤使用氧化剂将亚磷酯键转化为磷酸三酯键,所述氧化剂中包括碘液和氮甲基咪唑。本申请利用含有氮甲基咪唑的碘液作为氧化试剂合成寡核苷酸的方法,解决了寡核苷酸探针合成时间长、效率低、操作繁琐等问题。此外,采用本申请的合成方法,能够减少氧化步骤的反应时间、避免MGB探针在合成过程中出现杂质问题,并且在使用仪器合成普通序列时无需更换氧化剂,使得MGB探针与普通寡核苷酸序列的合成变得更加方便、快速、高效。
主权项:1.一种寡核苷酸的合成方法,其特征在于,包括如下步骤:脱保护步骤、偶联步骤、加帽步骤和氧化步骤;其中,在所述氧化步骤使用氧化剂将亚磷酯键转化为磷酸三酯键,所述氧化剂中包括碘液、氮甲基咪唑、四氢呋喃、吡啶和水;所述碘液中碘的浓度为0.02molL~0.1molL;以氮甲基咪唑、四氢呋喃、吡啶和水的体积之和为基准计,所述氮甲基咪唑的体积百分比为2%~20%,所述四氢呋喃的体积含量为60%~70%,所述吡啶的体积百分比为10%~30%,所述水的体积百分比为5%~15%。
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