买专利卖专利找龙图腾,真高效! 查专利查商标用IPTOP,全免费!专利年费监控用IP管家,真方便!
申请/专利权人:常州市智态生创科技有限公司
摘要:本发明涉及一种短肽的制备方法,包括以下步骤:将编码目标蛋白的基因序列与His‑SUMO标签序列融合,并将融合后的序列连接至表达载体上,得到重组表达载体;其中,目标蛋白序列中含有至少两种短肽,且短肽之间通过linker进行连接,所述linker选自DGE序列,或以天冬氨酸为N端第一个氨基酸且以谷氨酸为C端第一个氨基酸的序列;将重组表达载体转入宿主细胞中得到重组细胞,发酵培养重组细胞使其表达融合蛋白;从重组细胞中提取融合蛋白,对融合蛋白进行组合酶切和纯化,得到目标蛋白。本发明的制备方法降低了合成难度,提高了生产效率,减少杂质的产生,降低了纯化难度,生产一种及同时生产多种短肽能实现至少95%以上的纯度,且具有较高的回收率。
主权项:1.一种短肽的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:S1、将编码目标蛋白的基因序列与His-SUMO标签序列融合,并将融合后的序列连接至表达载体上,得到重组表达载体,进一步表达得到融合蛋白;其中,所述编码目标蛋白的基因序列中含有至少两种短肽的编码序列,且短肽之间通过linker进行连接,所述linker为DGE序列,所述融合蛋白的结构为His-SUMO-短肽1-DGE-短肽2,所述短肽1的序列为SEQIDNO.2,所述短肽2的序列为SEQIDNO.3;S2、将S1的重组表达载体转入宿主细胞中得到重组细胞,发酵培养重组细胞使其表达融合蛋白;S3、将融合蛋白与SUMO蛋白酶混合,酶切反应完成后分离短肽蛋白与His-SUMO标签,随后将短肽蛋白与AspN蛋白酶和GluC蛋白酶混合,酶切反应完成后分离短肽与linker,得到短肽成品。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 常州市智态生创科技有限公司 一种短肽的制备方法
免责声明
1、本报告根据公开、合法渠道获得相关数据和信息,力求客观、公正,但并不保证数据的最终完整性和准确性。
2、报告中的分析和结论仅反映本公司于发布本报告当日的职业理解,仅供参考使用,不能作为本公司承担任何法律责任的依据或者凭证。