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一种具有逆转录酶活性的Pfu DNA聚合酶突变体及其应用 

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申请/专利权人:湖北大学

摘要:本发明公开了一种具有逆转录酶活性的PfuDNA聚合酶突变体及其应用,所述PfuDNA聚合酶突变体包括K467RF588LW769R、R382HR385HV390I、I38LR97M、E665KE735K、K118IN713V,其中K118IN713V逆转录活性最强。同时,本发明的PfuDNA聚合酶突变体还保留了野生型酶的聚合酶活性,相较于常规逆转录酶较低的保真性,突变体本身的校准活性使其具备高保真性,加之高耐热性,使其能够以RNA为底物高效、高保真地生成cDNA,继而在标准PCR反应条件下扩增该cDNA,全过程无需额外添加逆转录酶,实现单酶“一步法”RT‑PCR。

主权项:1.一种具有逆转录酶活性的PfuDNA聚合酶突变体,其特征在于,所述PfuDNA聚合酶突变体为K118IN713V突变体,该突变体是将氨基酸序列如SEQIDNO.1所示的PfuDNA聚合酶的第118位的赖氨酸突变为异亮氨酸,同时将第713位的天冬酰胺突变为缬氨酸。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 湖北大学 一种具有逆转录酶活性的Pfu DNA聚合酶突变体及其应用

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