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末端脱氧核苷酸转移酶变体、核酸及应用 

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申请/专利权人:上海交通大学

摘要:本发明涉及末端脱氧核苷酸转移酶变体、核酸及应用,涉及基因工程领域。其包括野生型或携带突变的末端脱氧核苷酸转移酶TdT、单链DNA稳定因子sSF和柔性连接子;所述单链DNA稳定因子通过所述柔性连接子融合至所述末端脱氧核苷酸转移酶的N末端或和C末端,或者插入至所述末端脱氧核苷酸转移酶的序列中间处。本发明获得了不依赖于模板的末端脱氧核苷酸转移酶突变体,这些TdT突变体能显著提高其耦合天然核苷酸和3’‑OH修饰核苷酸的效率,同时增强了3’‑OH修饰核苷酸掺入到具有发卡二级结构寡核苷酸的合成效率,可用于高效可控的合成寡核苷酸,这些TdT突变体可用于酶促寡核苷酸的合成,或用于其他循环合成功能DNA片段。

主权项:1.末端脱氧核苷酸转移酶变体,其特征在于,其包括野生型或携带突变的末端脱氧核苷酸转移酶、单链DNA稳定因子和柔性连接子;所述单链DNA稳定因子通过所述柔性连接子融合至所述末端脱氧核苷酸转移酶的N末端或和C末端,或者所述单链DNA稳定因子通过所述柔性连接子插入至所述末端脱氧核苷酸转移酶的序列中间处;所述末端脱氧核苷酸转移酶变体的序列如SEQIDNO9至SEQIDNO15任意一项所示。

全文数据:

权利要求:

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