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基于内参的肉毒梭菌实时荧光定量PCR快检试剂及方法 

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申请/专利权人:陕西省食品药品检验研究院

摘要:本发明提供了基于内参的肉毒梭菌实时荧光定量PCR快检试剂及方法,可实现对整个反应过程的实时监测,有效防止“假阴性”结果的产生,该方法的特异性较好、灵敏度高、重现性较好;与传统培养方法至少需要42h检出相比,人工污染药品、食品和化妆品增菌8h后即可检出肉毒梭菌,检测时限的缩短一方面可以让产品快速放行,降低企业运行成本,另一方面可适用基于过程控制和风险评估的现代化管理模式。

主权项:1.基于内参的肉毒梭菌实时荧光定量PCR快检试剂,包括用于特异性扩增atx基因的特异性引物对和特异性探针以及用于特异性扩增Nmi基因的内参引物对和内参探针;所述特异性引物对和特异性探针的核苷酸序列为:RDSF:5’-TTGGACATGAAGTTTTGAATCT-3’,RDSR:5’-GTGCTAATGTTACTGCTGGATC-3’,RDSP:5’-FAM-GCGAAATGGTTATGGCTCTACTCAAT-BHQ1-3’;所述内参引物对和内参探针的核苷酸序列为:IACF:5’-AATGGAGAAAGCCCCTGTGAAG-3’,IACR:5’-TCACGTGAACCTGGAATTTGAC-3’,IACP:5’-CY5-CACTGCGCATCTAGTCCCGCTGAAC-BHQ3-3’;实时荧光定量PCR反应体系中,特异性引物RDSF和RDSR的终物质的量浓度分别为0.8μmolL、特异性探针RDSP的终物质的量浓度为0.16μmolL、内参探针IACP的终物质的量浓度为0.16μmolL、内参IAC的添加量为104~108拷贝数。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 陕西省食品药品检验研究院 基于内参的肉毒梭菌实时荧光定量PCR快检试剂及方法

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