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申请/专利权人：北京鼎成肽源生物技术有限公司
摘要：本发明属生物医药技术领域，提供一种有效敲除NK细胞中A2AR基因的sgRNA及NK细胞敲除A2AR的方法和应用，采用该方法获得不表达A2AR的NK细胞，以提高NK细胞的抗肿瘤功能，使其能开发成安全有效的抗肿瘤生物制剂，为过继免疫治疗肿瘤及病毒感染性疾病提供新的生物制剂。所述sgRNA的核苷酸序列如SEQIDNO.1、2、3或4所示。通过CRISPRCas9敲除细胞基因组中的A2AR，A2AR基因敲除后，能够促进细胞的体外增值，NK细胞基因敲除培养10天后，A2AR基因敲除的细胞扩增是野生型细胞的4倍。显著提高NK细胞的体外扩增能力，对NK细胞中A2AR敲除后，对肿瘤细胞的杀伤能力显著提升。
主权项：1.利用有效敲除NK细胞中A2AR基因的sgRNA进行NK细胞敲除A2AR的方法，其特征在于：所述sgRNA的核苷酸序列如SEQ、IDNO.1、SEQIDNO.2、SEQIDNO.3或SEQIDNO.4所示；具体方法为：利用CRISPRCas9基因编辑系统，所述sgRNA和CRISPRCas9蛋白共孵育，将所述sgRNA和Cas9蛋白的复合物RNP通过电转方式导入NK细胞中，培养2-3天；其中sgRNA与Cas9蛋白的摩尔比为1：0.5-2。
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百度查询： 北京鼎成肽源生物技术有限公司 一种有效敲除NK细胞中A2AR基因的sgRNA及NK细胞敲除A2AR的方法和应用
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